本发明公开了一种4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体,所述4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体由大肠杆菌(Escherichia coli)来源的野生型4HPA3H酶经过突变所得,野生型4HPA3H酶的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示,突变方式为以下一种:(1)I157L;(2)A211D;(3)I157L/A211D。本发明4‑羟基苯乙酸‑3‑羟化酶突变体,其中1157L、A211D两种突变体全细胞催化白藜芦醇活性相对于WT提高了1.84和2.07倍,同时将两个位点进行叠加所得的突变体I157L/A211D全细胞催化白藜芦醇活性相较于WT提高了2.46倍。