本发明提供了特异性结合HER2的纳米抗体及其应用,所述纳米抗体包括纳米抗体H75、纳米抗体H116、纳米抗体H178中的一种,所述纳米抗体H75的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示,所述纳米抗体H116的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示,所述纳米抗体H178的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示。本发明的特异性结合HER2的纳米抗体经ELISA实验、免疫共沉淀(co‑IP)实验检测结果表明,特异性结合HER2的纳米抗体均具有高度特异性,检测灵敏性高、均能在大肠杆菌中高效表达,可用于制备检测HER2的检测试剂或检测试剂盒或制备治疗肿瘤药物,且制备成本较低,有利于广泛应用。