本发明公开了一种烟草木葡聚糖内转葡糖基酶/水解酶蛋白基因NtXTH8及其应用，该烟草木葡聚糖内转葡糖基酶/水解酶蛋白基因NtXTH8来源于烟草，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，包括894bp个碱基。本发明通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术，构建了用于敲除NtXTH8基因的CRISPR/Cas9编辑载体，经遗传转化后获得了NtXTH8基因发生编辑突变体植株。在现蕾期、成熟期进行NtXTH8基因编辑植株与对照植株农艺性状调查，NtXTH8基因编辑植株中株高、腰叶长、腰叶宽等农艺性状进行测定，均低于对照；对精氨酸含量进行测定，发现成熟期基因编辑植株中精氨酸含量显著低于对照。
本发明公开了一种烟草ABA受体蛋白基因NtPYL6在调控烟草株高和叶片芸香苷含量中的应用，该NtPYL6基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术，构建了用于敲除NtPYL6基因的CRISPR/Cas9编辑载体，经编辑素材创制和分子检测鉴定后获得了NtPYL6基因敲除的烟草植株。本发明获得的NtPYL6基因敲除的编辑烟草植株，相比于对照烟草植株，现蕾期和成熟期的平均株高显著增高，叶片芸香苷含量显著降低，这为进一步阐明烟草成熟及芸香苷调控机理提供了理论依据，为培育株高和芸香苷含量显著改变的烟草品种提供了新的遗传材料。
本发明公开了一种烟草叶绿体相关蛋白基因NtTHF1及其应用,该烟草叶绿体相关蛋白基因NtTHF1来源于烟草，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，包括894bp个碱基。本申请通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术，构建了用于敲除NtTHF1基因的CRISPR/Cas9编辑载体，经遗传转化后获得了基因编辑突变体植株。本发明通过在正常条件下，现蕾期、成熟期进行NtTHF1基因编辑植株与对照植株农艺性状调查，NtTHF1基因编辑植株中株高、腰叶长及腰叶宽均低于对照植株中的，成熟期精氨酸、赖氨酸及脯氨酸含量均低于对照。综上所述，利用CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术敲除NtTHF1基因获得影响植株生长发育的基因编辑植株，这为烟草叶绿体相关蛋白研究及烟草生长发育研究提供遗传材料和理论依据。
本发明公开了一种烟草钙离子感受器相关的基因及其应用，该基因命名为烟草NtCBL4基因，其核苷酸序列为：SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列；SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列经取代和/或缺失和/或增加一个或多个核苷酸且具有相同功能的核苷酸序列；在严格条件下与SEQ ID NO.1所示序列杂交的核苷酸序列，严格条件为在含0.1％SDS的0.1×SSPE或含0.1％SDS的0.1×SSC溶液中，在65℃下杂交，并用该溶液洗膜。本发明可通过调节NtCBL4基因表达水平控制烟草的耐盐性，通过基因工程手段获得NtCBL4基因不同表达水平、不同耐盐性的转基因作物；过量表达NtCBL4能够降低烟草对高盐的耐受性。
