本发明公开了一种烟草ABA受体蛋白基因NtPYL6在调控烟草株高和叶片芸香苷含量中的应用,该NtPYL6基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明通过CRISPR/Cas9介导的基因编辑技术,构建了用于敲除NtPYL6基因的CRISPR/Cas9编辑载体,经编辑素材创制和分子检测鉴定后获得了NtPYL6基因敲除的烟草植株。本发明获得的NtPYL6基因敲除的编辑烟草植株,相比于对照烟草植株,现蕾期和成熟期的平均株高显著增高,叶片芸香苷含量显著降低,这为进一步阐明烟草成熟及芸香苷调控机理提供了理论依据,为培育株高和芸香苷含量显著改变的烟草品种提供了新的遗传材料。
本发明公开了一种烟草烟碱转运蛋白相关的基因及其应用,该基因为NtNTP1基因,其序列为SEQ ID No.1,对该基因的序列进行翻译后,其所编码蛋白序列为SEQ ID No.2。利用CRISPR/Cas9系统敲除烟草烟碱转运蛋白相关的基因的方法,包括以下步骤:(1)sgRNA引导序列的设计,sgRNA表达载体的构建;(2)将表达载体导入农杆菌;(3)侵染愈伤组织;(4)通过GC‑MS检测NtNTP1基因纯合敲除素材的现蕾期叶片的烟碱含量。本申请的基因及方法为烟草烟碱合成调控基因功能研究及低烟碱品种培育研究提供遗传材料和理论依据。