本发明涉及一种鸡伴性浅芦花羽基因的鉴定引物及试剂盒、鉴定方法及应用,属于动物遗传育种技术领域。本发明中鸡伴性浅芦花羽的分子标记为CDKN2A基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示,第27bp处发生C到T的突变。依据该分子标记设计引物、试剂盒及检测方法,利用本发明提供的检测方法或试剂盒能够检测待测鸡是否携带浅芦花羽性状突变等位基因,从而确定待测鸡是否为浅芦花羽鸡。本发明通过改变引物3’端的碱基来引入限制性内切酶Asu I识别位点,降低了检测成本,提高了检测效率。在实际生产和育种中,可以利用该方法准确剔除或纯合浅芦花羽性状。