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[发明专利]一种肌醇氧化酶重组大肠杆菌选育及转化方法-CN202310783407.5在审
发明人：朱理平;徐良平;马旭 -专利权人：诸城市浩天药业有限公司
申请日： 2023-06-29 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明属于微生物育种技术领域，公开了一种肌醇氧化酶重组大肠杆菌选育及转化方法，将肌醇氧化酶重组大肠杆菌在配方为酵母粉5g/L、蛋白胨10g/L、氯化钠10g/L、琼脂粉20g/L、肌醇5g/L、阿拉伯糖0.1g/100mL的选择培养基上37℃恒温培养18小时，然后选择颜色均匀单一、菌落凸起、表面圆润光滑、菌落直径为2～3mm的菌落，接种于平板培养基上37℃恒温培养18小时，再挑相同菌落形态的菌进行保存和LB液体培养，培养至菌液为OD600值为1.7时加入L‑阿拉伯糖，30℃，220rpm振荡培养12小时，然后离心、收集湿菌体进行转化，转化体系中加入0.1％的甲苯。本发明能定向得到稳定表达肌醇氧化酶的重组大肠杆菌菌体，并通过改变转化条件，提高葡萄糖醛酸的转化率。
一种氧化酶重组大肠杆菌选育转化方法

[发明专利]具有优良转运和反应活性的甾体C1,2脱氢反应工程菌株-CN202211205623.3在审
发明人：骆健美;王敏;申雁冰;贾红晨;朱文成;宋昭玉;艾露 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2021-03-02 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种具有优良转运和反应活性的甾体C1,2脱氢反应工程菌株，通过在简单节杆菌中过表达转运蛋白、或者共表达转运蛋白和热激蛋白来提高菌株的转运能力和胁迫耐受性，获得的上述工程菌株在高浓度底物和有机溶剂的转化体系中仍保持良好的催化活性，C1,2脱氢反应产率较对照菌株提高了1.42％‑51.74％。这种具有强转运能力和胁迫耐受性工程菌株，提高了转化体系中底物和有机溶剂浓度，进而提高了产物生成量，对于甾体类疏水性化合物高浓度底物转化效率的提高具有重要的指导意义。
具有优良转运反应活性 c1 脱氢工程菌株

[发明专利]一种利用葡萄糖生产乳酸单体的菌株及其应用-CN202211588150.X在审
发明人：田康明;赵满 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-12-12 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及发酵工程和基因工程技术领域，具体涉及一种可利用葡萄糖高转化率合成乳酸单体的生产菌株及其获得方法。本发明通过基因克隆与基因重组技术在乳酸单体生产菌株中通过温敏型质粒游离表达PDH复合体中的关键酶的编码基因，然后再缺失宿主染色体上的上述关键酶的编码基因，获得细胞生长和增殖可以通过培养温度进行调控的乳酸单体生产新菌种，实现细胞生长过程与发酵生产体系的培养温度形成关联，通过培养温度改变实现对细胞生长过程的开关控制，进而在发酵产乳酸阶段使葡萄糖等原料最大限度的流向乳酸单体的合成，获得利用葡萄糖高转化率发酵生产乳酸单体的生产菌种，其产酸阶段的糖酸转化率达到99％以上。
一种利用葡萄糖生产乳酸单体菌株及其应用

[发明专利]一种转化乳糖生成乳果糖的植物乳杆菌工程菌株及其构建方法与应用-CN202110968031.6有效
发明人：徐振上;刘新利;王婷 -专利权人：齐鲁工业大学
申请日： 2021-08-23 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种转化乳糖生成乳果糖的植物乳杆菌工程菌株及其构建方法与应用。本发明主要以植物乳杆菌NZ0203为基础，在植物乳杆菌NZ0203中过表达纤维二糖2‑差向异构酶。构建的植物乳杆菌工程菌株不消耗乳糖和乳果糖，有利于乳糖转化反应的进行以及乳果糖产物的积累，使得乳果糖产率显著提高，适用于乳果糖的高效生产。与酶促法生产乳果糖不同，本发明提供的乳果糖生产方法利用全细胞来催化，具有降低酶纯化成本和多次使用的优势，且利用益生菌来生产的益生元，更能够为人们所接受。
一种转化乳糖生成果糖植物杆菌工程菌株及其构建方法应用

[发明专利]具有新合成路径生产β-胸苷的重组微生物及生产β-胸苷的方法-CN202010502725.6有效
发明人：万丽花;江君君;陆红霞;胡志浩 -专利权人：苏州华赛生物工程技术有限公司
申请日： 2020-06-05 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种生产β‑胸苷的重组微生物，以及利用重组微生物通过新合成路径生产β‑胸苷。利用引入的外源基因，该合成路径从dCTP开始，通过脱氧胞苷三磷酸核苷酸酶产生dCMP，dCMP在脱氧胞苷一磷酸的催化下产生脱氧尿苷，后者经过重组微生物自身的磷酸激酶合成dUMP后参与到β‑胸苷的生产，开发了新的合成路径并提高胸苷产量，具有极大的创新性和市场应用前景。
具有合成路径生产重组微生物方法

[发明专利]可诱导共表达系统-CN202010672668.6有效
发明人： S·麦克莱恩;M·瓦拉塞克 -专利权人：艾伯赛公司
申请日： 2013-08-05 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明是能够受控诱导各基因产物的表达的可诱导共表达系统。
诱导表达系统

[发明专利]一种潜艇微生物传感器及其制备方法和应用-CN202210639825.2有效
发明人：杨建明;李美洁;吕书喆;汤若昊;王兆宝 -专利权人：青岛农业大学
申请日： 2022-06-08 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种潜艇微生物传感器及其制备方法和应用。所述潜艇微生物传感器包括含有感应金属镉Cd(II)的感应蛋白Cad的感应元件以及电信号元件蛋白mtrCAB，并敲除乳酸脱氢酶1dh基因，增加了细胞内可释放电子，过表达孔蛋白基因OprF增强细菌粘附电极和增加膜磁导率。本发明所构建的潜艇微生物传感器能够感应低浓度的金属镉Cd(II)离子，而产生强电信号，进而实现了对低浓度金属镉离子的实时检测。与其他检测方法相比，所述潜艇微生物传感器检测金属镉离子操作更简便、信号收集更容易，能够用于海洋中对潜艇外壳氧化还原反应释放的金属镉离子的检测，因此具有广泛的应用前景。
一种潜艇微生物传感器及其制备方法应用

[发明专利]一种超表达β-半乳糖苷酶的乳酸片球菌及应用-CN202310419242.3在审
发明人：彭楠;刘玲;罗雨藩;王维韬;蔡殷凡;赵述淼 -专利权人：华中农业大学
申请日： 2023-04-19 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种超表达β‑半乳糖苷酶的乳酸片球菌及应用，属于生物工程技术领域。所述乳酸片球菌保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCCNO：M2023183。本发明通过基因改造获得超表达β‑半乳糖苷酶的工程菌，与野生型菌株相比，该工程菌在含有高浓度胆盐、香兰素、对羟基苯甲醛、丁香醛或者低pH的培养基中均表现出显著的生存优势，且能够有效降低香兰素以及对羟基苯甲醛等酚醛抑制物的浓度，此外，工程化乳酸片球菌在乳酸发酵过程中具有更高的乳酸生产效率，且对酒精性肝病具有显著的治疗作用，这对于秸秆的资源化利用，聚乳酸等绿色可降解材料的生产、新型饲料添加剂的开发，及活体生物药物的研究具有重要意义。
一种表达半乳糖乳酸球菌应用

[发明专利]一种利用二氧化碳产琥珀酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202310044446.3在审
发明人：王乐;李忠增 -专利权人：河南工业大学
申请日： 2023-01-30 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种产琥珀酸的基因工程菌及其构建方法与应用，属于生物工程技术领域；本发明还提供了该菌株的构建方法与发酵生产琥珀酸的方法。通过在谷氨酸棒状杆菌中表达蓝藻的HCO3‑转运子，使谷氨酸棒状杆菌有主动转运HCO3‑的能力，再通过过量表达磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因增强CO2的固定。并进一步通过转运与固定基因的协同表达，将转运进入胞内的HCO3‑和CO2及时固定，增加重组工程菌对CO2的利用效率，实现琥珀酸产量和产率的提高,具有工业应用前景。
一种利用二氧化碳琥珀酸基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种提高5-羟基色氨酸产量的发酵工艺-CN202110714160.2有效
发明人：金敏;徐庆阳;余子辰;张震;师丹阳 -专利权人：军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所;天津科技大学
申请日： 2021-06-25 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高5‑羟基色氨酸产量的发酵工艺，一方面将金属离子螯合氨基酸添加到发酵培养基中，另一方面在发酵2h流加复合辅料，所述方法中采用金属离子螯合氨基酸，不仅补充了发酵培养基中有效氨基酸的营养成分，而且增加了菌体对于微量元素的吸收效果，提高了菌体的生长活力和生产性能；同时谷氨酰胺加强了合成5‑羟基色氨酸的转氨作用，α‑酮戊二酸满足了合成5‑羟基色氨酸能量供应，前体物色氨酸促进了5‑羟基色氨酸的合成能力。
一种提高羟基色氨酸产量发酵工艺

[发明专利]一种胞外蛋白酶失活的枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用-CN202111251656.7有效
发明人：刘龙;陈坚;吕雪芹;堵国成;李江华;刘延峰;李洋;武耀康 -专利权人：江南大学
申请日： 2021-10-25 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种胞外蛋白酶失活的枯草芽孢杆菌及其构建方法与应用，本发明以B.subtilis 168为出发菌株，使用CRISPR/Cpf1技术在基因组上整合了木糖诱导型启动子PxylA控制的转录因子comK‑comS基因，使其转化效率大幅提高；回复突变了trpC基因和gudB基因，使其能够合成色氨酸并有效利用谷氨酸家族氨基酸；此外，将6个胞外蛋白酶基因进行了敲除，不仅降低了细胞的代谢压力，而且使重组蛋白能在胞外有效累计。利用最终的工程菌株G601在进行发酵时生产的胞外sfGFP的含量是B.subtilis 168的1.88倍，胞内胞外sfGFP总含量是B.subtilis 168的1.94倍。由本发明构建的工程菌转化简便、无营养缺陷、有更好的氨基酸利用能力、胞外蛋白酶活性低，能广泛应用于重组蛋白的分泌表达，具有广阔的应用前景。
一种蛋白酶枯草芽孢杆菌及其构建方法应用

[发明专利]一种植物免疫诱抗菌及其构建方法和应用-CN202210611849.7有效
发明人：王源超;杨波;高学文;郑小波;伍辉军;刘银;俞晨杰;杨森;董莎萌;叶文武;郑素娇 -专利权人：南京农业大学
申请日： 2022-05-31 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明涉及一种植物免疫诱抗菌及其构建方法和应用，上述植物免疫诱抗菌为利用CRISPR/Cas9基因编辑技术将大豆疫霉激发子PsPII1编码基因整合到枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的基因组上而获得的转基因生防芽孢杆菌。上述转基因生防芽孢杆菌能够在植物根际生存过程中持续分泌大豆疫霉激发子PsPII1，其不仅能够减少大豆主要病原菌对黄化苗的侵染，还能提高大豆植株对病原菌的抗性；且在大田体系中验证，经转基因生防芽孢杆菌发酵液处理的大豆株高显著增高，大豆的单株荚数增加，大豆产量显著提高，其对大豆根腐病具有良好的生防效果。
一种植物免疫抗菌及其构建方法应用

[发明专利]一种根瘤菌的双基因突变体及其应用-CN202210541563.6有效
发明人：辛大伟;王锦辉;马超;陈庆山;武小霞;齐照明;杨明亮;胡振帮;赵莹;刘春燕;邹佳男 -专利权人：东北农业大学
申请日： 2022-05-18 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供一种根瘤菌的双基因突变体及其应用，属于农用微生物技术领域。为了在降低人工人本的前提下，减少根瘤的数量，解决了很难控制大豆根瘤数量的技术问题。本发明提供了一种根瘤菌HH103的双基因突变体所述双基因突变体是以根瘤菌为出发菌，将出发菌株中的NopT基因和NopP基因进行突变或者沉默获得的。经过数次实验和不同群体的验证表明HH103ΩNopTΩNopP能减少大豆的根瘤的数量，为后续研究大豆‑根瘤菌共生体系形成提供了基础，为提高大豆与根瘤菌的共生效率提供了可能性。
一种根瘤菌基因突变体及其应用

[发明专利]运动发酵单胞菌的基因工程菌株及其应用-CN202211138020.6有效
发明人：杨世辉;耿碧男;何桥宁;杜军;李勉 -专利权人：湖北大学
申请日： 2022-09-19 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本申请公开了一种运动发酵单胞菌的基因工程菌株及其应用。该基因工程菌株是将ZM4‑Cas12a菌株中pZM32、pZM36、pZM33、pZM39四个内源性质粒敲除得到的菌株。该基因工程菌株ZMNP获得了一种精简的基因组，减少能量消耗，并且具有一系列的优良性状，如转化效率高、更加耐受抑制物、对二次母液的利用能力更好等优异性能，十分适合作为工业微生物的底盘细胞。
运动发酵单胞菌基因工程菌株及其应用

[发明专利]一种用于生物合成胆红素的重组大肠杆菌及其应用-CN202310623616.3在审
发明人：梅建凤;季军情;陈乐生;应国清;易喻 -专利权人：浙江工业大学;上海和不同科技有限公司
申请日： 2023-05-29 - 公布日： 2023-08-08 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明公开了一种用于生物合成胆红素的重组大肠杆菌及其应用，所述重组大肠杆菌同时表达沼泽红假单胞菌(Rhodopseudomonas palustris)来源的5‑氨基乙酰丙酸合成酶、集胞藻(Synechocystis sp.)来源的血红素加氧酶和胆绿素还原酶。本发明重组大肠杆菌在不添加外源血红素的条件下，经发酵后，按发酵液体积计，胆红素的发酵产率为12.3mg/L，干菌体中胆红素的含量可达0.315％。本发明开辟了一种非动物胆汁来源的胆红素生产方法，对降低胆红素的生产成本具有显著效果。
一种用于生物合成胆红素重组大肠杆菌及其应用