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[发明专利]一种生产5-羟色胺的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202310722800.3在审
发明人：徐庆阳;刘韪玮;余子辰;李旭;陈志超;张震 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2023-06-19 - 公布日： 2023-08-15 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种生产5‑羟色胺的基因工程菌及其构建方法与应用，利用代谢工程手段引入外源相关基因表达，并对关键酶进行密码子优化。具体为：敲除色氨酸酶tnaA；过表达芳香族氨基酸转运蛋白yddG；构建外源5‑羟色胺合成途径包括色氨酸羟化途径(人源色氨酸羟化酶变体TM2)、色氨酸脱羧途径(黑曲霉来源色氨酸脱羧酶TDC)和辅酶四氢喋呤的合成再生途径(枯草芽孢杆菌来源GTP环化水解酶ⅠmtrA、人源6‑丙酮酰四氢生物蝶呤合成酶PTPS、人源鸟蝶呤还原酶SPR、人源蝶呤‑4α‑甲醇氨脱水酶PCD、人源双氢喋呤还原酶DHPR)，该菌株可高效催化色氨酸生成5‑羟色胺，具有良好的应用价值。
一种生产羟色胺基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种提高5-羟基色氨酸产量的发酵工艺-CN202110714160.2有效
发明人：金敏;徐庆阳;余子辰;张震;师丹阳 -专利权人：军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所;天津科技大学
申请日： 2021-06-25 - 公布日： 2023-08-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高5‑羟基色氨酸产量的发酵工艺，一方面将金属离子螯合氨基酸添加到发酵培养基中，另一方面在发酵2h流加复合辅料，所述方法中采用金属离子螯合氨基酸，不仅补充了发酵培养基中有效氨基酸的营养成分，而且增加了菌体对于微量元素的吸收效果，提高了菌体的生长活力和生产性能；同时谷氨酰胺加强了合成5‑羟基色氨酸的转氨作用，α‑酮戊二酸满足了合成5‑羟基色氨酸能量供应，前体物色氨酸促进了5‑羟基色氨酸的合成能力。
一种提高羟基色氨酸产量发酵工艺

[发明专利]一种L-酪氨酸发酵过程中降低泡沫的方法-CN202310127834.8在审
发明人：徐庆阳;余子辰;张震;赵春光 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2023-02-17 - 公布日： 2023-07-25 - 主分类号： C12P13/22 文献下载
摘要：本发明提供了一种L‑酪氨酸发酵过程中降低泡沫的方法，通过在L‑酪氨酸结晶初期，L‑酪氨酸发酵产生大量泡沫时添加适量L‑酪氨酸晶种，增大晶体，加快L‑酪氨酸结晶速度；同时通过超声辅助结晶的方法增大晶体，优化晶型，从而减少因L‑酪氨酸结晶而带来的发酵过程泡沫过多的问题；所述方法解决了现有L‑酪氨酸在发酵过程中，由于结晶细小引起发酵液起泡严重的问题；同时降低消泡剂(有效成分为表面活性剂)消耗量，避免了菌体生长过程中表面活性剂过度使用产生的负面影响，具有重要的应用价值。
一种酪氨酸发酵过程降低泡沫方法

[发明专利]一种生产5-羟基色氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202211173124.0在审
发明人：徐庆阳;张震;余子辰 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2022-09-26 - 公布日： 2023-04-11 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种生产5‑羟基色氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用，所述基因工程菌在原有5‑HTP工程菌株的基础上，应用了一种异源表达活性高、毒性低的色氨酸羟化酶突变体，构建了更加高效的色氨酸羟化途径；同时通过适度表达异源来源于Exiguobacterdium sibiricum的葡萄糖脱氢酶(GDHesi)途径，构建了NAD(P)H再生途径，最终大幅提高了工程菌株的5‑HTP产量，并有效降低了中间体L‑Trp的积累浓度，得到了一株遗传背景清晰、能通过微生物直接发酵法高效稳定生产5‑HTP的基因工程菌，具有良好的应用价值。
一种生产羟基色氨酸基因工程及其构建方法应用

[发明专利]用于产生5-羟基色氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用-CN202110714155.1有效
发明人：徐庆阳;金敏;张震;余子辰;师丹阳 -专利权人：天津科技大学;军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所
申请日： 2021-06-25 - 公布日： 2023-02-03 - 主分类号： C12N1/21 文献下载
摘要：本发明提供了一种用于产生5‑羟基色氨酸的基因工程菌及其构建方法与应用，首先对大肠杆菌中色氨酸合成途径和整个氨基酸代谢网络中与色氨酸相关的代谢流进行分析重构，加强了5‑HTP前体物色氨酸的供应。之后又引入人源2型色氨酸羟基化酶突变体和四氢蝶呤合成与再生途径，打通色氨酸胞内羟化反应，得到了一株遗传背景清晰、能通过微生物直接发酵法高效稳定生产5‑HTP的无质粒基因工程菌，具有良好的应用价值。
用于产生羟基色氨酸基因工程及其构建方法应用

[发明专利]一种提高5-羟基色氨酸产量的方法-CN202110677156.3有效
发明人：徐庆阳;余子辰;张震 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2021-06-18 - 公布日： 2022-08-23 - 主分类号： C12N1/38 文献下载
摘要：本发明提供了一种提高5‑羟基色氨酸产量的方法，在发酵中期产酸阶段减少通风量，降低溶氧，流加柠檬酸，保证BH4合成过程还原力充足，在底糖消耗尽后降低补糖速率，减少色氨酸累积；该方法通过控制溶氧到细胞亚适量，流加柠檬酸抑制EMP途径，增强HMP途径，降低发酵过程葡萄糖流加速率来提高5‑HTP产量，减少中间产物色氨酸，解决了四氢蝶呤在生物发酵过程中被氧化消耗，合成过程还原力不足以及色氨酸过量累积影响5‑HTP产量的问题。
一种提高羟基色氨酸产量方法

[发明专利]一种5-羟基色氨酸分离提取方法-CN202110677155.9在审
发明人：徐庆阳;陈志超;余子辰;张震 -专利权人：天津科技大学
申请日： 2021-06-18 - 公布日： 2021-10-29 - 主分类号： C07D209/20 文献下载
摘要：本发明提供了一种5‑羟基色氨酸分离提取方法，发酵工程菌为大肠杆菌E.coli HTP10，提取步骤包括发酵获得发酵液、菌体分离、色素分离、副产物分离、蛋白分离、干燥获得产品；所述方法解决了微生物发酵生产5‑HTP提取困难的问题，提取过程操作简单，步骤少，提高了提取收率；提取设备要求低，降低了提取成本，提高了提取效率；产品提取纯度高，提取收率可观，提高了产品竞争力与生产利润；提取过程清洁环保，具有环境友好性，降低了后续废气废液处理成本，进一步提高了经济效益。
一种羟基色氨酸分离提取方法