[发明专利]细胞毒性的吡啶并吖啶类生物碱

说明书

本发明提供新的细胞毒性吡啶并吖啶类(pyridoacridine)生物碱，其中的一种Shermilamine D是从被囊动物Cystodytes violatinctus中分离而得。

发明背景

海洋生物，特别是软珊瑚、海绵和被囊动物，能产生许多次级代谢产物并表现出广泛的生物学活性(参考文献13：Faulkner，D．J．Nat．Prod．Reports．，1997，14，259-302及其中所引用的参考文献)。生物碱是这些代谢产物中重要的一类；在1983年报道了一种海洋生物碱amphimedine的结构(参考文献14：Schmitz，F．J．等，J．Am．Chem．Soc．1983，105，4835-4836)、后来合起来称为“吡啶并吖啶类”的新一类海洋生物碱中的第一个。从那时起，已报道了超过40个这类例子(参考文献1：Molinski，T．F．化学评论，1993，93，1825-1838)。吡啶并吖啶类是具有显著特征的海洋衍生的生物碱，其主要基于11H-吡啶并[4，3，2-mn]吖啶结构，如下所示：

11H-吡啶并[4，3，2-mn]吖啶骨架

一类显著细胞毒性的海洋吡啶并吖啶类生物碱是Shermilamine类(参考文献6：Scheuer，P．J．等，有机化学杂志，1988，53，4619-4620。参考文献5：Scheuer，P．J．等，有机化学杂志。1989，54，4231-4232。参考文献3：Kashman，Y．等，有机化学杂志．1989，54，5335-5337。参考文献12：Barrows，L．R．；Ireland，C．M．等，有机化学杂志，1994，37，3819-3827)，其结构式如下所示：

Shermilamine A：R¹=Br  R²=(CH₃)

Shermilamine B：R¹=H  R²=(CH₃)

Shermilamine C：R¹=H  R²=(CH=C(CH₃)₂)

Shermilamines类均分离自被囊动物，其中A和B得自Trididemnum sp．，C得自Cystodytes sp．。

发明概述

本发明提供了具如下式(Ⅰ)的新的吡啶并吖啶类：

其中R独立选自含有氢或溴的基团。

更具体地讲，本发明涉及从被囊动物Cystodytes violatinctus中提取和分离的Shermilamine D(在式(Ⅰ)中R=H)。

Shermilamine D表现出抗肿瘤活性。特别是，Shermilamine D对源自人实体瘤，如人肺癌、人结肠癌和人黑色素瘤等的细胞系均表现出抗肿瘤活性。而且对其他肿瘤细胞系如白血病和淋巴瘤也表现出抗肿瘤活性。

对具式(Ⅰ)的化合物敏感的患恶性肿瘤的哺乳动物，本发明还提供了一种治疗方法。它包括给予有效治疗量的具式(Ⅰ)的化合物或其药用组合物。

本发明还进一步提供了以式(Ⅰ)的化合物为活性成分的药用组合物，以及其制备方法。

本发明的另一方面提供了制备化合物Shermilamine D(在式(Ⅰ)中R=H)的方法，其包括从被囊动物Cystodytes violatinctus中的提取和分离。

发明的最佳实施方案

药用组合物的实例包括任何固体(片、丸、胶囊、颗粒等)或液体(溶液、悬浮液或乳剂)的、具适合口服、局部或非肠道给药方式的制剂。并且它们可能含有纯的化合物、或含有与之合用的任何载体或其他药学活性化合物。这些组合物在非肠道给药时可能需要经过灭菌处理。

含式(Ⅰ)化合物的药用组合物的准确剂量按照药用制剂、使用方式以及宿主和肿瘤的具体治疗部位而变化。其他因素象年龄、体重、性别、饮食、给药时间、排泄速率、宿主状态、联合用药情况、反应敏感性及疾病的严重程度都应考虑之内。在最大耐受剂量范围内组合物可连续或定期用药。

抗肿瘤活性

细胞在Eagle’s极限必需培养基内保持于对数生长期，培养基中含Eagle’s缓冲盐、2．0mM的L-谷酰胺以及非必需氨基酸，不含碳酸氢钠(EMEM／neaa)；最后补充加入10％的胎牛血清(FCS)、10^-2M的碳酸氢钠、0. 1g／l青霉素-G和硫酸链霉素。