[发明专利]用固相法检测生物活性物质无效

专利信息
申请号: 97196375.4 申请日: 1997-05-13
公开(公告)号: CN1225134A 公开(公告)日: 1999-08-04
发明(设计)人: 罗纳德·阿·马夸特;肖浩;王国杰;张志群;甘志波 申请(专利权)人: 曼尼托巴大学
主分类号: C12Q1/00 分类号: C12Q1/00;G01N33/53;G01N33/537;G01N33/543;G01N33/573
代理公司: 中科专利代理有限责任公司 代理人: 林道濂
地址: 加拿大曼*** 国省代码: 暂无信息
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摘要:
搜索关键词: 用固相法 检测 生物 活性 物质
【权利要求书】:

1.一种利用生物自身活性检测具有生物活性物质的生物活性量的固相检测法,包括以下步骤:

a.一组份1结合到表面,其中该组份1与一指示剂1偶联;

b.一样品中包含组份2,其生物活性未知,与已偶联的组份1接触,混合物反应条件是:保持组份1与组份2之间生物活性反应,使组份1解离;

c.在确定的反应时间后,去掉样品;以及

d.测定仍然旧结合的组份1的量,其中生物活性与残留的组份1的量之间是反比关系。

2.根据权利要求1所述的方法,其中该组份2是酶,该组份1是该酶的底物。

3.根据权利要求2所述的方法,其中该酶是一种能够降解底物的酶,该底物是选自由聚合物底物和非聚合物组成的类组。

4.根据权利要求3所述的方法,其中聚合物底物是选自由蛋白、多肽、碳水化合物、DNA、RNA组成的类组。

5.根据权利要求4所述的方法,其中蛋白是选自酪蛋白、白蛋白、胶原蛋白和明胶使之成为一种用于选出蛋白酶的底物。

6.根据权利要求2所述的方法,其中酶是β-葡聚糖酶,底物是葡聚糖。

7.根据权利要求2所述的方法,其中酶是蛋白酶,底物是酪蛋白。

8.根据权利要求2所述的方法,其中酶是木聚糖酶,底物是阿拉伯木聚糖酶。

9.根据权利要求2所述的方法,其中酶是纤维素酶,底物是纤维素。

10.根据权利要求1所述的方法,其中所述的测定步骤包括,加入一个与该指示剂1结合的有标记的指示剂2,测量结合上去的有标记的指示剂2的量。

11.根据权利要求10所述的方法,其中指示剂1是生物素。

12.根据权利要求11所述的方法,其中指示剂2是亲和素或链霉抗生物素蛋白。

13.根据权利要求10所述的方法,其中该标记物选自碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、颜色染料、荧光分子、发光分子、β-半乳糖苷酶、尿酶、氚、14C和碘。

14.根据权利要求1所述的方法,其中该样品是一个抽提物。

15.根据权利要求1所述的方法,其中所述的测定步骤包括测量尚存留指示剂1的量的步骤。

16.根据权利要求15所述的方法,其中所述的指示剂1是选自由碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶、颜色染料、荧光分子、发光分子、β-半乳糖苷酶、尿酶、氚、14C和碘所组成的类组。

17.一种利用生物抑制活性通过固相检测法检测具有生物活性物质的生物活性抑制剂含量的方法,包括下列步骤:

a.一组份1结合到表面,其中该组份1与一指示剂1偶联;

b.一样品中含有已知含量的组份2,其生物活性也已知,样品中还有未知含量的组份3,它是组份2的抑制剂,该样品与组份1接触,此混合物是在这样条件下进行反应:该组份1和组份2之间的生物活性解离该组份1,同时,该组份3干扰该组份1和组份2之间的反应;

c.去除样品;以及

d.测定尚存留结合的组份1的量,其与样品中组份3的量是正比关系。

18.一种利用生物抑制活性通过固相检测法鉴定具有生物活性物质的方法,包括下列步骤:

a.一组份1结合到表面,其中该组份1与指示剂1偶联;

b.一样品中含有组份2,已知其具有一般生物活性但不知其特性,样品中还有已知含量的组份3,它可能是组份2的抑制剂,样品与组份1接触,此混合物是在这样条件下进行反应:该组份1和组份2之间的生物活性反应解离该组份1,同时该组份3干扰组份1和2之间的反应;

c.在预先确定时间后,去除样品;以及

d.测定尚存留结合的组份1的量,如果其量减少,则该组份3干扰了组份1和2之间的反应,从而鉴定出该组份2。

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