[发明专利]酪氨酸酶衍生的分离肽及其应用

说明书

相关申请

本申请是1994年2月28日申请的系列号NO.08/203,054(该申请是1993年6月23日申请的在审申请系列号NO.08/081,673的部分继续申请)的部分继续申请，而NO.08/081,673申请又是在审美国专利申请系列号054714(1994年4月28日申请)的部分继续申请，054714号申请是1992年12月22日申请的在审美国专利申请系列号994,928的部分继续申请。

发明领域

本发明涉及衍生自酪氨酸酶的分离肽及其应用，所说肽是由HLA-A2和HLA-B44分子呈递的。另外，本发明涉及鉴别被诊断患有细胞异常状态的个体之能力，其中细胞异常状态的异常细胞呈递这些肽和HLA-A2和HLA-B44的复合物，还涉及呈递的肽及其衍生物。

背景和现有技术

哺乳动物免疫系统识别外源和外来材料并发生反应的过程是一个复杂的过程，该系统的一个重要的方面是T细胞应答。这种应答要求T细胞识别称作为人白细胞抗原(“HLA”)或者主要组织相容性复合物(“HMCs”)的细胞表面分子和肽形成的复合物并与之发生作用。这些肽来源于被也能呈递HLA/MHC分子的细胞加工的较大分子。参见例如Male et al.，Advanced Immunology(J.P.Lipincott Company，1987)，特别是第6-10章。由于要求T细胞特异于HLA分子和一种肽的特定结合，所以T细胞和HLA/肽的复合物的相互作用受到限制。如果不存在特定的T细胞，即使存在其配体复合物也没有T细胞应答。同样，如果没有特定的复合物但存在T细胞，也不发生应答。其机理涉及免疫系统的外来材料的应答，自身免疫病理学，和对细胞异常的应答。最近，更多的研究集中于将蛋白质加工为HLA结合肽的原理，在这方面，参见Barinaga，Science 257：880(1992)；Fremont el al.，Science 257：919(1992)：Matsumura et al.，Science 257：927(1992)；Latron et al.，Science 257：964(1992)。

在癌症中也涉及T细胞识别细胞异常的机理，例如PCT申请PCT/US92/04354，1992年5月22申请，1992年11月26日公开，作为本文的参考，其中公开了一个基因族，它被加工为肽，该肽依次在细胞表面表达，从而导致由特异性CTLs裂解肿瘤细胞。据说这些基因编码“肿瘤排斥抗原前体”或“TRAP”分子，并且将由此产生的肽称作为“肿瘤排斥抗原”或“TRAs”。有关该基因族的其它信息参见Traversari etal.，Immunogenetics 35：145(1992；vander Bruggen et al.，Science 254：1643(1991)。

在美国专利申请系列号938,334(作为本文的参考)中，公开了与HLA-A1分子结合的九肽。该参考文献告诉我们，如果已知特定肽与特定HLA分子的特异性，应该可以预期该特定肽与一种HLA分子结合，但不与另一种结合。这是重要的，因为不同的个体具有不同的HLA表型。因此尽管对作为特定的HLA分子的配体的特定肽的鉴别具有诊断和治疗意义，但他们仅与有特定HLA分子表型的个体相关。在该领域内还需要作进一步的研究，因为细胞异常状态并不局限于一个特定的HLA表型，进行有目的治疗需要一些已经公开的异常细胞表型知识。

酪氨酸酶催化将酪氨酸转化为脱羟基苯基丙氨酸或者“DOPA”的反应并且显示选择性的在黑素细胞上表达(Muller el al.，EMBOJ7：2715(1988))，在Kwon，U.S.Patent NO.4,898,814最早报道有关人的该酶的cDNA。由Bouchardet al.，J.Exp.Med.169：2029(1989)的最近报道提供了稍微有差异的序列。对于鉴别该酶的抑制剂已经花费了大量的精力，因为它与色素沉着疾病有关。该文献的一些例子包括Jinbow，wo9116302；Mishima et al.，U.S.Patent NO.5，077,059，和Nazzaropor，U.S.Patent No.4,818,768，技术人员对其它公开类似物质的文献是熟知的。