[发明专利]一种RNA保存液及其制备方法在审
申请号: | 202310374084.4 | 申请日: | 2023-04-10 |
公开(公告)号: | CN116479090A | 公开(公告)日: | 2023-07-25 |
发明(设计)人: | 汤展翔;李艳艳 | 申请(专利权)人: | 核小体(北京)生物技术有限公司 |
主分类号: | C12Q1/6806 | 分类号: | C12Q1/6806 |
代理公司: | 北京集智东方知识产权代理有限公司 11578 | 代理人: | 陈亚斌;关兆辉 |
地址: | 102299 北京市昌平区*** | 国省代码: | 北京;11 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 rna 保存 及其 制备 方法 | ||
1.一种RNA保存液,其特征在于,所述RNA保存液按照组分终浓度计量,包括以下组分:
二硫苏糖醇:2mM-10mM;
柠檬酸盐:1mM-3mM;
硫酸铵:10-19mM;
黄原酸酯:0.1-0.6g/L;以及
其余为无菌无酶的去离子水/DEPC水。
2.根据权利要求1所述的一种RNA保存液,其特征在于,所述二硫苏糖醇的终浓度为6mM-10mM,所述柠檬酸盐的终浓度为1.5mM-2mM,所述硫酸铵的终浓度为10-16mM,所述淀粉黄原酸酯的终浓度为0.2-0.5g/L。
3.根据权利要求1所述的一种RNA保存液,其特征在于,所述二硫苏糖醇的终浓度为8mM,所述柠檬酸盐的终浓度为2mM,所述硫酸铵的终浓度为13mM,所述淀粉黄原酸酯的终浓度为0.4g/L。
4.根据权利要求1所述的一种RNA保存液,其特征在于:所述RNA保存液的pH为4.5-7.5。
5.根据权利要求1所述的一种RNA保存液,其特征在于:所述RNA保存液的pH为4.5-6.5。
6.一种用于制备权利要求1-5任意一项所述RNA保存液的制备方法,其特征在于,包括:
依次向无菌无酶的离心管中分别加入二硫苏糖醇溶液和柠檬酸盐缓冲溶液;
依次向所述离心管中加入硫酸铵溶液和黄原酸酯溶液;
向所述离心管中加入无菌无酶的去离子水/DEPC水,充分溶解后,使得二硫苏糖醇的终浓度为2mM-10mM,柠檬酸盐的终浓度为1mM-3mM,硫酸铵的终浓度为10-19mM,黄原酸酯的终浓度为0.1-0.6g/L,得到RNA保存液。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,在向所述离心管中加入无菌无酶的去离子水/DEPC水之后,还包括:对所述离心管内的溶液进行微滤。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,对所述离心管内的溶液进行微滤,包括:
使用孔径为0.22μm的微滤膜对所述离心管内的溶液过滤,得到第一滤液;
使用孔径为0.1μm的微滤膜对所述第一滤液过滤,得到第二滤液;
将所述第二滤液放于60℃的环境中保温10min,得到最终的RNA保存液。
9.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,向所述离心管中加入无菌无酶的去离子水/DEPC水,充分溶解后,使得二硫苏糖醇的终浓度为6mM-10mM,柠檬酸盐的终浓度为1.5mM-2mM,硫酸铵的终浓度为10-16mM,黄原酸酯的终浓度为0.2-0.5g/L。
10.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,向所述离心管中加入无菌无酶的去离子水/DEPC水,充分溶解后,使得二硫苏糖醇的终浓度为8mM,柠檬酸盐的终浓度为2mM,硫酸铵的终浓度为13mM,黄原酸酯的终浓度为0.4g/L。
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