[发明专利]菌株及其在制备泰乐菌素A中的应用在审
| 申请号： | 202310345421.7 | 申请日： | 2023-04-01 |
| 公开（公告）号： | CN116426450A | 公开（公告）日： | 2023-07-14 |
| 发明（设计）人： | 李金娥;魏宝霆;李俊乐;田宇清;张集慧;谭华荣 | 申请（专利权）人： | 中国科学院微生物研究所 |
| 主分类号： | C12N1/21 | 分类号： | C12N1/21;C12N15/53;C12N15/55;C12N15/60;C12N9/88;C12N9/02;C12N9/16;C12N15/76;C12N15/66;C12P19/62;C12R1/54 |
| 代理公司： | 北京大田律师事务所 11941 | 代理人： | 姜义民 |
| 地址： | 100029 北*** | 国省代码： | 北京;11 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 菌株 及其 制备 菌素 中的 应用 | ||
1.基因在发酵产泰乐菌素A或构建发酵产泰乐菌素A的链霉菌中的应用，其特征在于，
所述基因包括：强启动子和ovmFGIH基因。
2.依据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述强启动子为PhrdB启动子、PermE*启动子或PkasO*启动子；
所述PhrdB启动子序列如序列表SEQ ID NO:4所示。
3.依据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述ovmFGIH基因包括ovmH基因、ovmG基因、ovmI基因和ovmF基因；
所述ovmH基因的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:1；
所述ovmG基因的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:2；
所述ovmI基因的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:3；
所述ovmF基因的氨基酸序列如序列表SEQ ID NO:8。
4.依据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述链霉菌为弗氏链霉菌ATCC 19609。
5.构建工程菌WT/FGIH的方法，其特征在于，包括：
通过大肠杆菌ET12567将重组大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒导入弗氏链霉菌ATCC 19609中；
所述重组大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒的构建方法是将两个PCR产物PhrdB和ovmFGIH与经过NotI和EcoR V双酶切的大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒进行连接；
所述PCR产物PhrdB的构建方法是以天蓝色链霉菌M1146的基因组为模板，用引物152-Ph F/PhrdB R进行PCR扩增；
所述PCR产物ovmFGIH的构建方法是以圈卷产色链霉菌7100的基因组为模板，用引物Ph-ovmF F/ovmH-152R进行PCR扩增。
6.依据权利要求5所述构建工程菌WT/FGIH的方法，其特征在于，所述大肠杆菌-链霉菌穿梭质粒为pSET152、pKC1139或pIJ10500。
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