[发明专利]一种高效表达生淀粉α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌重组菌及其应用

权利要求书

1.一种高效表达生淀粉α-淀粉酶的枯草芽孢杆菌重组菌，其特征在于：

所述枯草芽孢杆菌重组菌是以pBHSS142为表达载体、以来源于Pontibacillus sp.ZY的生淀粉α-淀粉酶基因AmyZ1为目的基因、以枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis WB600为表达宿主，在目的基因的上游插入信号肽基因YpuA，改造了启动子spoVG、5'非翻译区序列和5'近端编码序列；

所述枯草芽孢杆菌重组菌的分类命名为BacillussubtilisWB600/pBHSS142-C1-amyZ1，保藏于中国典型培养物保藏中心(CCTCC)，地址：中国·武汉·武汉大学，保藏编号为CCTCC NO：M 2022980，保藏日期为2022年6月27日。

2.一种权利要求1所述的枯草芽孢杆菌重组菌的应用，其特征在于：

通过对枯草芽孢杆菌重组菌发酵培养，生产生淀粉α-淀粉酶。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：

将所述枯草芽孢杆菌重组菌先接种于种子培养基中培养，得到种子液；然后将所述种子液接种至发酵培养基中培养。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：

所述种子培养基的成分包含8～12g/L的蛋白胨、4～6g/L的酵母粉以及8～12g/L的氯化钠。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：

所述发酵培养基的成分包含14～18g/L的胰蛋白胨、8～12g/L的酵母浸粉以及4～6g/L的氯化钠；所述发酵培养基的初始pH为6.5～7.5。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：

挑取所述枯草芽孢杆菌重组菌单菌落接种于种子培养基中，于35～38℃、180～220rpm下培养8-10h，得到种子液；然后将种子液以1:50的比例接种至发酵培养基中，于30～37℃、180～220rpm下培养45～50h。