[发明专利]猪肌内脂肪含量性状相关的ADIG基因单倍型变异遗传标记及应用

权利要求书

1.一种猪肌内脂肪含量性状相关的ADIG基因单倍型变异遗传标记，其特征在于：其核苷酸序列如序列表SEQ ID NO：1所示，该遗传标记的核苷酸序列的251bp处有一个GA突变位点，该遗传标记的核苷酸序列的426bp处有一个GA突变位点，两个突变位点完全连锁。

2.一种用于获得权利要求1所述遗传标记的引物对，其特征在于：该引物对为：

正向引物：5’-CCCCTTTCATCTCACAAC-3’

负向引物：5’-ACAATCTACCCAGGCTCT-3’。

3.一种权利要求1所述遗传标记的获得方法，其特征在于：以硒都黑猪基因组DNA混合池为模板，采用以下引物对：

正向引物：5’-CCCCTTTCATCTCACAAC-3’

负向引物：5’-ACAATCTACCCAGGCTCT-3’

进行PCR扩增，其获得的遗传标记为SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2。

4.一种利用权利要求1所述遗传标记鉴定猪肌内脂肪含量性状的方法，其特征在于：包括如下步骤：

1)引物对的设计

根据猪ADIG基因的基因组序列(GenBank登陆号：NC_010459.5)设计以下引物对：

正向引物：5’-CCCCTTTCATCTCACAAC-3’

负向引物：5’-ACAATCTACCCAGGCTCT-3’；

2)PCR扩增

利用上述引物在硒都黑猪混合基因组DNA池中进行PCR扩增，PCR反应体系50μL，体系中各组分的浓度为100ng模板DNA、10×buffer(含Mg2+)4μL、上述上下游引物各0.5μM、2.5μMdNTPs、1U TaqDNA聚合酶；

PCR的运行程序为：95℃预热2min；94℃变性20s，58℃退火40s，72℃延伸60s，共35个循环；72℃延伸10min；4℃保存，PCR产物用1.5％琼脂糖凝胶电泳检测；

3)PCR产物纯化及测序，得到如SEQ ID NO：1或SEQ ID NO：2的核苷酸序列，根据序列峰形图进行单倍型基因分型。

5.一种权利要求1所述遗传标记在猪肌内脂肪含量性状相关遗传标记辅助育种中的应用。

6.一种权利要求2所述遗传标记的引物对在猪肌内脂肪含量性状相关遗传标记辅助育种中的应用。