[发明专利]检测流感病毒H5、H7、H9亚型的引物和探针及其应用、试剂和数字PCR试剂盒在审
申请号: | 202210770639.2 | 申请日: | 2022-06-30 |
公开(公告)号: | CN114959121A | 公开(公告)日: | 2022-08-30 |
发明(设计)人: | 周鑫鑫;田星;王虹军;陈芝娟;贺贤汉 | 申请(专利权)人: | 杭州博日科技股份有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/6851;C12N15/11;C12R1/93 |
代理公司: | 北京超凡宏宇专利代理事务所(特殊普通合伙) 11463 | 代理人: | 张金铭 |
地址: | 310000 浙江省杭州市*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 检测 流感病毒 h5 h7 h9 引物 探针 及其 应用 试剂 数字 pcr 试剂盒 | ||
1.一种检测流感病毒H5、H7、H9亚型的引物和探针,其特征在于,所述引物包括第一引物对、第二引物对和第三引物对;
所述第一引物对具有如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示的核酸序列;所述第二引物对具有如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的核酸序列;所述第三引物对具有如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示的核酸序列;
所述探针包括第一探针、第二探针和第三探针;
所述第一探针具有如SEQ ID NO.7所示的核酸序列;所述第二探针具有如SEQ ID NO.8所示的核酸序列;所述第三探针具有如SEQ ID NO.9所示的核酸序列。
2.根据权利要求1所述的引物和探针,其特征在于,所述探针的5’端连接有荧光报告基团,3’端连接有荧光淬灭基团。
3.根据权利要求2所述的引物和探针,其特征在于,所述荧光报告基团包括FAM、CY5或HEX;
优选地,所述荧光淬灭基团包括TAMRA、BHQ1或BHQ2。
4.权利要求1-3任一项所述的引物和探针在制备流感病毒H5、H7、H9亚型检测产品中的应用;
优选地,所述检测产品包括数字PCR试剂盒。
5.一种试剂,其特征在于,包括权利要求1-3任一项所述的引物和探针。
6.一种数字PCR试剂盒,其特征在于,包括权利要求1-3任一项所述的引物和探针以及数字PCR反应预混液。
7.根据权利要求6所述的数字PCR试剂盒,其特征在于,所述数字PCR反应预混液,包括:Buffer、Mg2+、dNTPs、热启动Taq酶和逆转录酶。
8.根据权利要求6所述的数字PCR试剂盒,其特征在于,还包括阳性对照品;
所述阳性对照品包括H5亚型H基因片段、H7亚型H基因片段和H9亚型H基因片段。
9.根据权利要求8所述的数字PCR试剂盒,其特征在于,所述阳性对照品为含有H5亚型H基因片段、H7亚型H基因片段和H9亚型H基因片段的重组质粒。
10.根据权利要求6所述的数字PCR试剂盒,其特征在于,还包括阴性对照品;
所述阴性对照品为无核酸酶水。
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