[发明专利]一种靶向的长循环尿激酶纳米粒及其制备方法

权利要求书

1.一种靶向的长循环尿激酶纳米粒，其特征在于，原料包括尿激酶、载体材料、表面活性剂及靶向多肽；所述载体材料为聚乙二醇-聚乳酸共聚物或聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸共聚物，其中，聚乙二醇-聚乳酸共聚物或聚乙二醇-聚乳酸乙醇酸共聚物中的-聚乳酸或聚乳酸乙醇酸嵌段的分子量为15000～40000，聚乙二醇嵌段的分子量为2000～4000；所述表面活性剂为司盘80、泊洛沙姆188、吐温80、聚乙烯醇中的任意一种或几种的混合物。

2.权利要求1所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤1)：将载体材料、表面活性剂溶于二氯甲烷中，得到混合溶液；将尿激酶溶于去离子水中，得到内水相；将内水相加入到混合溶液中，超声乳化，形成初乳；

步骤2)：将初乳倒入含有表面活性剂的水溶液中，超声乳化，形成第一步复乳；将第一步复乳再倒入含有表面活性剂的水溶液中，超声乳化，形成复乳；

步骤3)：将复乳倒入含有表面活性剂的水溶液中，搅拌，然后离心，取沉淀，用水洗涤后再次离心，将所得沉淀物取出，重悬于2-吗啉代乙烷磺酸溶液中，再加入1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺，置于摇床孵育；再次进行离心洗涤，将所得沉淀物取出；

步骤4)：将步骤3)所得沉淀物重悬于2-吗啉代乙烷磺酸溶液中，并加入多肽，置于摇床孵育，即得靶向的长循环尿激酶纳米粒；将该纳米粒离心洗涤，将所得沉淀物取出后，混悬于含有甘露醇的溶液中，冷冻干燥，得到相应的载药微囊。

3.如权利要求2所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中表面活性剂为司盘80与泊洛沙姆188的混合物，两者的质量比为(20～30)：(10～15)。

4.如权利要求2所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中载体材料、表面活性剂、二氯甲烷按g:g:g:L计的比例为(20～100):(20～200):1。

5.如权利要求2所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，所述步骤1)中尿激酶与去离子水的质量比为1:(5～10)。

6.如权利要求2所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，所述步骤2)中表面活性剂为吐温80，其水溶液与步骤1)中二氯甲烷的体积比为(2～10)：1，吐温80在水溶液中的质量浓度为2～3％。

7.如权利要求2所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中表面活性剂为聚乙烯醇，其水溶液与步骤1)中二氯甲烷的体积比为(20～100)：1，PVA在水溶液中的质量浓度为0.1～1％。

8.如权利要求2所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，所述步骤3)中2-吗啉代乙烷磺酸溶液的浓度为0.1～0.5mol/L，其pH值为5.2；1-乙基-(3-二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺的摩尔比为(1～4):1。

9.如权利要求2所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，所述步骤1)、步骤2)、步骤3)均在0～4℃下进行。

10.如权利要求2所述的靶向的长循环尿激酶纳米粒的制备方法，其特征在于，所述步骤4)中2-吗啉代乙烷磺酸溶液的浓度为0.1～0.5mol/L，其pH值为8；甘露醇溶液与步骤3)中复乳的体积比为(1-3)：10，甘露醇在溶液中的质量浓度为2～5％；冷冻干燥的温度为-40℃，时间为12～40小时。