[发明专利]一种使用树脂吸附尿液中尿激酶的方法在审
| 申请号： | 202010652914.1 | 申请日： | 2020-07-08 |
| 公开（公告）号： | CN111647586A | 公开（公告）日： | 2020-09-11 |
| 发明（设计）人： | 顾京;李争;魏飘飘;唐维;熊心磊;丁晶 | 申请（专利权）人： | 江苏尤里卡生物科技有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/72 | 分类号： | C12N9/72 |
| 代理公司： | 北京精金石知识产权代理有限公司 11470 | 代理人： | 尉月丽 |
| 地址： | 211200 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明中提供了一种使用树脂吸附尿液中尿激酶的方法，属于分离提取技术领域。包括以下步骤：(1)、制备尿激酶溶液；(2)、制备尿激酶冻干粉；在尿激酶制备过程中使用D6246树脂袋吸附尿液中尿激酶无需对尿液进行其他处理，然后将树脂袋装入层析柱中，洗脱即可得到尿激酶，在实施过程中通过控制洗脱缓冲液为体积比为1：1‑2的醋酸缓冲液和磷酸缓冲液的混合溶液以及控制上样量与柱体积的比为20‑50：1，能够更好的分离尿激酶，使液体尿激酶的收率可达到75‑88％，冻干后尿激酶的收率可达到70‑80％，纯度可达到25％以上。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 使用 树脂 吸附 尿液 尿激酶 方法 | ||
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- 顾京;李争;魏飘飘;唐维;熊心磊;丁晶 - 江苏尤里卡生物科技有限公司
- 2020-07-08 - 2020-09-11 - C12N9/72
- 本发明中提供了一种使用树脂吸附尿液中尿激酶的方法，属于分离提取技术领域。包括以下步骤：(1)、制备尿激酶溶液；(2)、制备尿激酶冻干粉；在尿激酶制备过程中使用D6246树脂袋吸附尿液中尿激酶无需对尿液进行其他处理，然后将树脂袋装入层析柱中，洗脱即可得到尿激酶，在实施过程中通过控制洗脱缓冲液为体积比为1：1‑2的醋酸缓冲液和磷酸缓冲液的混合溶液以及控制上样量与柱体积的比为20‑50：1，能够更好的分离尿激酶，使液体尿激酶的收率可达到75‑88％，冻干后尿激酶的收率可达到70‑80％，纯度可达到25％以上。
- 一种尿激酶的制备方法及其冻干粉-201911345268.8
- 李尔华;顾京;赵江峰;魏文培 - 江苏尤里卡生物科技有限公司
- 2019-12-24 - 2020-07-31 - C12N9/72
- 本发明涉及一种高纯度大分子尿激酶的制备方法及其冻干粉，属于生物化学工程技术领域。具体包括步骤：(1)制备尿激酶粗品；(2)制备尿激酶精品；(3)提纯；所述步骤(3)中将步骤(2)得到的尿激酶精品溶解后，将尿激酶精品溶液加入阳离子交换层析柱进行提纯；将提纯后的尿激酶进行冻干即得到尿激酶冻干粉。所述阳离子交换层析柱中充填的填料为Capto S impAct、SP sepharose HP、source 30S中的一种。本发明选择高分辨率离子交换层析，在保证纯度和活性收率的前提下，大大降低了生产成本，使得高纯度大分子量尿激酶的规模化生产成为可能。
- 泡沫分离法浓缩人尿中尿激酶的方法-201810371575.2
- 李瑞;关晶;葛顺;朱友双 - 济宁医学院
- 2018-04-24 - 2020-04-21 - C12N9/72
- 本发明的技术方案属于生物分离领域，尤其涉及泡沫分离法浓缩人尿中尿激酶的方法。该工艺包括：第一步，合格尿液的检测；第二步，合格尿液的预处理；第三步，两级泡沫分离工艺。该工艺通过加入尿激酶活性稳定剂有效抑制了泡沫分离过程中气‑液界面诱导的尿激酶失活，大幅提高了尿激酶活性的富集比(尿激酶活性富集比为100.0～233.3)，又能增大回收率(高尿激酶总活性收率为75.0～90.0％)。
- 一种从粗品中提取尿激酶的方法-201711272128.3
- 刘乃山;夏衬来;冯骋武 - 青岛康原药业有限公司
- 2017-12-06 - 2019-06-14 - C12N9/72
- 本发明公开了一种从粗品中提取尿激酶的方法。先用高浓度的盐溶液从粗品中提纯尿激酶，再用低浓度的盐溶液对尿激酶进一步纯化提取。在对尿激酶进行纯化提取过程中，通过不同浓度、不同成分的提取液，使尿激酶溶解于提取液中，然后在提取液中加入一定比例的乙醇使尿激酶沉淀析出。通过两种不同浓度抽提液的纯化、沉淀、脱水、干燥等步骤来实现从粗品中进一步提纯尿激酶。利用本方法提取的尿激酶效价高、杂质少、稳定性好，且本方法工艺较为简单、生产成本低、产量高、可进行工业化生产。
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