[发明专利]一种马铃薯晚疫病的抗性评价方法

权利要求书

1.一种马铃薯晚疫病的抗性评价方法，其特征在于包括如下步骤：

1)马铃薯晚疫病菌的生理小种鉴定：

从马铃薯发病叶片分离得到晚疫病菌后，利用国际上通用的马铃薯晚疫病菌生理小种划分表，根据病原菌菌株对鉴别寄主的侵染反应划分成不同生理小种，其中R0为不含抗病基因，R1-R11分别含有不同的抗病基因，对应的病原菌生理小种为r1-r11；

2)马铃薯晚疫病菌孢子悬浮液的接种：

21)马铃薯采用起垄栽培，参试品种随机排列，三次重复，并在田块四周分别种植至少1行早熟诱发感病品种和1行中晚熟诱发感病品种，

22)在马铃薯封垄期，选择致病疫霉混合小种进行全田接种处理，接种时选择3个及以上的混合菌株，其生理小种类型涵盖r1至r11中的5种及以上，

23)将病原菌培养产生孢子囊后，制成1～3×10⁴个/mL的孢子囊悬浮液，对马铃薯叶片进行喷雾处理，以叶片布满菌液但无滴落为度，在病菌接种的当天，采用人工喷雾系统以一定的时间间隔喷雾，使田间植物冠层的相对湿度始终维持在100％以上，同时白天在田间罩上黑色遮阳纱网，促进病菌对马铃薯叶片的有效侵染，

24)从病菌接种的第2天开始，当空气湿度在90％以下时，人工喷雾系统以一定的时间间隔喷雾，使田间植物冠层的相对湿度始终维持在90％以上，当白天阳光强烈或温度超过30℃时，同时在田间罩上黑色遮阳纱网，以保持田间植株冠层的温度不高于30℃；

3)马铃薯晚疫病的调查：

在病菌接种7天后调查，调查所有马铃薯植株发病情况，计算发病率，其中发病率＝发病株数/总株数×100％；

4)马铃薯晚疫病圃的建立：

在病菌接种7天后调查时，当早熟诱发品种的发病率达到100％，同时中晚熟诱发品种的发病率达到80％以上，说明病原菌接种成功，当早熟诱发品种的发病率低于100％，或者中晚熟诱发品种的发病率低于80％，说明接种失败，需要重复接种，直至早熟诱发品种的发病率达到100％，同时中晚熟诱发品种的发病率达到80％以上；

5)马铃薯晚疫病的田间抗性评价：

51)在病圃中马铃薯晚疫病菌接种7天后开始，每5～10天调查全部马铃薯植株的病斑面积百分率，共调查4～6次，直到对照的感病品种达到该年度最高发病面积百分率100％时结束，

52)以病害发展曲线下面积AUDPC为基础进行抗病性评价，AUDPC值用一段时间内马铃薯感病率的百分比值来表示，校正相对AUDPC值CrAUDPC由AUDPC转换得到，

其中马铃薯晚疫病0～10级分级标准如下：0％，0级，无病；0.05％，1级，仅有零星叶片被侵染；0.50％，2级，平均每单株有1个叶片被侵染；1％，3级，平均每单株有4个叶片被侵染；2.50％，4级，平均每单株有8到10个叶片被侵染；10％，5级，10％叶片被侵染，叶片仍然呈现绿色；25％，6级，25％叶片被侵染，基本所有植株已被侵染；50％，7级，50％叶片被侵染，田间植株呈现褐绿色；75％，8级，75％叶片被侵染，25％仍保持绿色；95％，9级，只有少部分叶片还呈现绿色，植株茎也被侵染；100％，10级，全田植株复叶和茎部均已枯死，

式中t表示中心病株出现后每次调查的天数，y表示每次调查时被感染叶片的百分比，n表示调查次数，i表示1开始的整数，

式中AUDPC_ck和AUDPC_n分别表示对照品种和被鉴定品种的AUDPC平均值，

53)马铃薯晚疫病田间抗性综合评价标准如下表1所示，其中将马铃薯划分为高抗(HR)、抗(R)、中抗(MR)、中感(MS)、感(S)和高感(HS)共6种类型，以CrAUDPC值作为评价依据，

表1

2.根据权利要求1所述的一种马铃薯晚疫病的抗性评价方法，其特征在于：所述步骤2)中的早熟诱发感病品种为费乌瑞它或希森3号，中晚熟诱发感病品种为米拉。

3.根据权利要求1所述的一种马铃薯晚疫病的抗性评价方法，其特征在于：所述步骤2)中的人工喷雾系统的出水为细雾，喷头间距根据有效射程设置，喷杆高度0.5-1.5m，可根据马铃薯不同品种植株高度自行调节，以保证所有出水能覆盖马铃薯植株冠层。