[发明专利]一种鉴定自交不亲和系Ⅱ类S单元型青花菜的引物对及其应用和鉴定方法

权利要求书

1.一种鉴定自交不亲和系Ⅱ类S单元型青花菜的引物对，其特征在于，所述引物对包括引物SP11-2F和引物SP11-2R；

所述引物SP11-2F的碱基序列如SEQ ID NO.1所示，所述引物SP11-2R的碱基序列如SEQID NO.2所示。

2.一种鉴定自交不亲和系Ⅱ类S单元型青花菜的产品，其特征在于，所述产品中包含有权利要求1所述的引物对。

3.根据权利要求2所述的产品，其特征在于，所述产品为试剂或试剂盒。

4.如权利要求1所述的引物对或权利要求2所述的产品在鉴定自交不亲和系Ⅱ类S单元型青花菜中的应用。

5.如权利要求1所述的引物对或权利要求2所述的产品在自交不亲和系Ⅱ类S单元型青花菜育种中的应用。

6.一种鉴定自交不亲和系Ⅱ类S单元型青花菜的方法，其特征在于，所述方法包括对待测样品的DNA模板进行PCR扩增，并检测扩增产物中是否含有SP11基因的DNA片段，若扩增产物中含有SP11基因的DNA片段，则待测样品为自交不亲和系Ⅱ类S单元型青花菜；

所述PCR扩增时使用的引物包括权利要求1或2所述的引物对。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述SP11基因的DNA片段的长度为362bp。

8.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系包括所述引物SP11-2F，所述引物SP11-2R，2×Utaq PCR Mix，模板DNA，ddH₂O；

优选地，每20μL所述PCR扩增体系中，含有1uL 10μM所述引物SP11-2F，1uL 10μM所述引物SP11-2R，10uL 2×Utaq PCR Mix，1uL模板DNA，7uL ddH₂O。

9.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的条件包括在94-98℃预变性1-5min；94-95℃变性20-40s，50-55℃退火20-30s，70-72℃延伸20-40s，25-35个循环；70-72℃延伸0-10min；

优选地，所述PCR扩增的条件包括在94℃预变性4min；94℃变性30s，52℃退火30s，72℃延伸30s，30个循环；72℃延伸7min。

10.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，采用凝胶电泳方法检测所述扩增产物；

优选地，所述凝胶电泳是采用2-3％的琼脂糖凝胶在100-110V恒压下50-60min进行电泳检测。