[发明专利](S)-转氨酶及其应用

权利要求书

1.一种(S)-转氨酶，所述(S)-转氨酶的氨基酸序列由SEQ ID No.3表示。

2.一种(S)-转氨酶，其氨基酸序列与SEQ ID No.3所示氨基酸序列具有至少90％、91％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性，且所述(S)-转氨酶来源于Corynebacterium vitaeruminis DSM 20294。

3.分离的核酸，其表达权利要求1或2所述的(S)-转氨酶。

4.根据权利要求3所述的核酸，其核苷酸序列由SEQ ID No.4表示。

5.含权利要求3或4所述核酸的重组载体。

6.重组微生物，其表达i)，或同时表达i)和ii)：

i)权利要求1或2所述的(S)-转氨酶；

ii)(R)-转氨酶，其氨基酸序列：a)由SEQ ID No.1表示；或b)与SEQ ID No.1所示氨基酸序列具有至少90％、91％、91％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性，且所述(R)-转氨酶来源于Pseudarthrobacter chlorophenolicus。

7.根据权利要求6所述的重组微生物，其含有1)，或同时含有1)和2)：

1)权利要求5所述的重组载体；

2)含能够表达所述(R)-转氨酶的核酸的重组载体。

8.根据权利要求1或2所述的(S)-转氨酶在制备L-草铵膦中的应用。

9.L-草铵膦的制备方法，包括：

在氨基供体存在的条件下，2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸被权利要求1或2所述的(S)-转氨酶还原胺化，生成L-草铵膦。

10.根据权利要求9所述的制备方法，所述2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸的制备方法包括：

在氨基受体存在的条件下，(R)-转氨酶介导D,L-草铵膦中的D-草铵膦的脱氨反应生成2-羰基-4-(羟基甲基膦酰基)丁酸。

11.根据权利要求10所述的方法，其中所述氨基受体为丙酮酸。

12.根据权利要求9-11任一项所述的方法，其中所述氨基供体为L-天冬氨酸或L-丙氨酸。

13.根据权利要求10或11所述的方法，其中所述氨基受体和所述D,L-草铵膦的摩尔比为1:500-1:5。

14.根据权利要求10所述的方法，其中所述方法包括：在共表达所述(R)-转氨酶和所述(S)-转氨酶的重组微生物、氨基受体和氨基供体的存在下，使D,L-草铵膦转化为L-草铵膦。

15.根据权利要求10所述的制备方法，所述(R)-转氨酶的氨基酸序列：

a)由SEQ ID No.1所示；或

b)与SEQ ID No.1所示氨基酸序列具有至少90％、91％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％的同一性，且所述(R)-转氨酶来源于Pseudarthrobacter chlorophenolicus。