[发明专利]TMEM144在制备肿瘤药物中的应用

说明书

本发明公开了TMEM144在制备肿瘤药物中的应用；具体公开了TMEM144基因或其抑制剂在制备宫颈癌的诊断或治疗药物中的应用以及与该基因相关的药物筛选方法和疾病诊断设备。本发明通过还提供了一种含有hsa‑miR‑23a或hsa‑miR‑23a mimics的宫颈癌治疗药物，该药物能够通过提高细胞内hsa‑miR‑23a的含量，从而抑制TMEM144基因的表达实现对宫颈癌的抑制。

技术领域

本发明属于生物医学领域，具体涉及TMEM144在制备肿瘤药物中的应用、存储介质及电子设备。

背景技术

小干扰RNA(small interfering RNA，siRNA)一般是20-25bp的双链短RNA链，它可以通过降解mRNA，干扰翻译过程，从而降低蛋白质的表达水平。通过脂质体转染、电转等方式，直接将siRNA导入细胞后，细胞内的一种特殊蛋白复合体(RISC复合体)能够和siRNA结合，解开其双链，使双链RNA变为单链RNA。打开的单链RNA能够和mRNA上的互补序列结合，然后RISC复合体会切断与其互补的mRNA序列。完成这一系列操作后，RISC-siRNA复合体带着单链的siRNA，会从切断的mRNA上解脱，再去结合、降解其他的mRNA。基因的mRNA被切断以后，就不能进行后续的蛋白翻译，无法合成蛋白质。因此，蛋白质的表达水平下降，基因的功能被沉默掉。除了直接导入siRNA到细胞内，还可以导入siRNA的前体——长双链RNA进入细胞。长双链RNA进入细胞后，会被细胞内部的Dicer酶切割，生成siRNA，进而敲减相应的基因。除长双链RNA外，短发卡RNA(shRNA)也可以作为siRNA的前体。shRNA被切割成siRNA后，也可以敲减目标基因。siRNA在细胞内属于消耗品，消耗完之后，mRNA的表达便不再被抑制，蛋白水平也会恢复。因此，siRNA的敲减是一种瞬时的作用。

短发卡RNA(short hairpin/small hairpin RNA，shRNA)是一种短的颈环结构，类似发卡。shRNA一般通过质粒病毒等载体导入细胞内。以病毒载体为例，导入的shRNA是以DNA形式存在。在细胞核内，载体上相应的序列会转录出pri-miRNA，这是一种具有颈环结构的小RNA(microRNA,miRNA)。细胞内的Drosha酶会修剪pri-miRNA的两端序列，使其变成小RNA，这正是shRNA的前体(pre-shRNA)。pre-shRNA会走出细胞核，到达细胞质。进入细胞质以后，pre-shRNA便形成了成熟的shRNA。shRNA在Dicer酶作用下，环状结构被切掉，只剩下发卡的“茎”，这是核心的siRNA序列。siRNA会以上述同样的机制，发挥基因敲减的作用。shRNA需要经细胞内的酶进行切割，才能转变成siRNA而发挥作用。与siRNA的瞬态效果相比，shRNA可以通过病毒载体整合到基因组，因此可以稳定表达，长久持续地发挥作用。

miRNA小分子核糖核酸/微核糖核酸(microRNA)，真核生物中广泛存在的一种长约22nt(21-24nt)的核糖核酸分子，成熟的miRNA为单链RNA，通过降解靶标mRNA或抑制蛋白质翻译调节目标基因的表达。

宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率均高居女性恶性肿瘤第四位，严重危害女性健康。NCBI对人源TMEM144蛋白序列注释信息为345个氨基酸构成，分子量在37.6kD。对TMEM144进行跨膜区分析发现TMEM144为5+5TM跨膜蛋白，含有10个跨膜区，且由两个结构域组成，分别为CEO family(DUF1632)和Sugar transport蛋白家族，NCBI对该蛋白的注释信息为碳水化合物转运蛋白。目前关于TMEM144的功能研究目前有两篇文献提到，El-Heliebi报道TMEM144可能参与脊索瘤细胞表型分型。此外，Prentice等发现TMEM144在鼠下丘脑中与GPR54/kisspeptin signalling通路是密切相关的，且该信号通路参与了青春期促性腺激素释放激素(GnRH)的分泌。而TMEM144具体的功能以及与宫颈癌的关系尚未文献报道。

发明内容