[发明专利]一种区分三角鲂性别的分子标记、试剂盒及区分方法

说明书

一种区分三角鲂性别的分子标记、试剂盒及区分方法，本发明区分三角鲂性别的分子标记的引物对为HLJFLf3和HLJFLr3。区分三角鲂性别的方法：一、提取待测三角鲂样本基因组DNA；二、以提取的基因组DNA为模板，以HLJFLf3和HLJFLr3为引物进行PCR扩增，获得PCR产物；三、对PCR产物进行电泳检测，电泳结果出现582bp条带的对应样本为雄性，无扩增条带的样本为雌性。本发明公开了三角鲂的性别特异性分子标记以及性别鉴定方法，能够在三角鲂早期发育阶段确定个体性别，进而控制后备亲鱼群体的性比，降低养殖和维护成本。本发明在三角鲂早期发育阶段便可确定个体性别，为研究三角鲂性别与生长等商业性状之间的关联奠定了基础。

技术领域

本发明涉及一种区分三角鲂性别的分子标记、试剂盒及区分方法。

背景技术

鲂属鱼类是我国淡水鱼家族中的重要一员，其主要包括分布于长江中下游大型湖泊中广为人知的团头鲂(武昌鱼)、长江上游的厚颌鲂、珠江和海南水系的广东鲂以及广泛分布于多个水系的三角鲂。

三角鲂个体大、肉质好，适合不同地域消费者的烹饪及饮食习惯，且该鱼易饲养、易起捕、抗病抗逆性强，适合池塘、网箱等多种养殖方式。尽管有学者指出，三角鲂有望成为继团头鲂之后最具养殖潜力的鲂属鱼类，但不可否认的是三角鲂在养殖量、市场认可度、品种选育等方面均远不及团头鲂。目前，由于过度捕捞和环境破坏等原因，三角鲂仅存黑龙江、浙江杭州钱塘江和湖北红安金沙河水库3个自然分布的种群。利用现代分子遗传学手段，开展三角鲂的种质特性和新品种培育研究势在必行。

根据近几年的调查，野生黑龙江三角鲂需7龄方能达到性成熟。在养殖条件下，黑龙江三角鲂性成熟年龄约需5龄，南方种群需3龄。三角鲂在性成熟前的个体发育早期阶段，无明显的性别特征。对于性成熟晚、成熟时个体相对较大的养殖鱼类来说，亲鱼的培育周期长，群体养殖和维护成本较高。育种企业若能通过性别的早期鉴定随时掌控后备亲鱼群体的性比，则可适当减少亲本的培育数量，从而有效降低养殖和维护成本，提高整体经济效益。

发明内容

本发明提供了一种区分三角鲂性别的分子标记、试剂盒及区分方法。

本发明区分三角鲂性别的分子标记的引物对为HLJFLf3和HLJFLr3，具体序列为：

HLJFLf3：5'-GATGATGGTCAAATGAACTAG-3'；

HLJFLr3：5'-ATGGGATGGAGCAATGCAATG-3'。

进一步，黑龙江三角鲂的性别分子标记核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；钱塘江三角鲂和金沙河水库三角鲂的性别分子标记核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示。

黑龙江三角鲂的性别分子标记与钱塘江三角鲂和金沙河水库三角鲂的性别分子标记均为582bp。

区分三角鲂性别的试剂盒包括分子标记引物对HLJFLf3和HLJFLr3。HLJFLf3：5'-GATGATGGTCAAATGAACTAG-3'；HLJFLr3：5'-ATGGGATGGAGCAATGCAATG-3'。

区分三角鲂性别的方法：

一、提取待测三角鲂样本基因组DNA；

二、以提取的基因组DNA为模板，以HLJFLf3和HLJFLr3为引物进行PCR扩增，获得PCR产物；

三、对PCR产物进行电泳检测，电泳结果出现582bp条带的对应样本为雄性，无扩增条带的样本为雌性，即完成三角鲂的性别鉴定。

本发明公开了三角鲂的性别特异性分子标记以及性别鉴定方法，能够在三角鲂早期发育阶段确定个体性别，进而控制后备亲鱼群体的性比，降低养殖和维护成本。

本发明在三角鲂早期发育阶段便可确定个体性别，为研究三角鲂性别与生长等商业性状之间的关联奠定了基础。