[发明专利]一种区分三角鲂性别的分子标记、试剂盒及区分方法

权利要求书

1.一种区分三角鲂性别的分子标记，其特征在于该分子标记的引物对为HLJFLf3和HLJFLr3，具体序列为：

HLJFLf3：5'-GATGATGGTCAAATGAACTAG-3'；

HLJFLr3：5'-ATGGGATGGAGCAATGCAATG-3'。

2.一种区分三角鲂性别的试剂盒，其特征在于该试剂盒包括分子标记引物对HLJFLf3和HLJFLr3；

其中，HLJFLf3和HLJFLr3的具体序列为：

HLJFLf3：5'-GATGATGGTCAAATGAACTAG-3'；

HLJFLr3：5'-ATGGGATGGAGCAATGCAATG-3'。

3.根据权利要求2所述的区分三角鲂性别的试剂盒，其特征在于该试剂盒还包括去离子水、10×Taq Buffer、MgCl₂、dNTPs和TaqDNA 聚合酶。

4.区分三角鲂性别的方法，其特征在于该方法按以下步骤进行：

一、提取待测三角鲂样本基因组DNA；

二、以提取的基因组DNA为模板，以HLJFLf3和HLJFLr3为引物进行PCR扩增，获得PCR产物；

三、对PCR产物进行电泳检测，电泳结果出现582bp条带的对应样本为雄性，无扩增条带的样本为雌性，即完成三角鲂的性别鉴定；

其中，所述HLJFLf3和HLJFLr3的具体序列为：

HLJFLf3：5'-GATGATGGTCAAATGAACTAG-3'；

HLJFLr3：5'-ATGGGATGGAGCAATGCAATG-3'。

5.根据权利要求4所述的区分三角鲂性别的方法，其特征在于步骤二中PCR扩增体系如下：

成分 用量

去离子水 13.8µL

10×Taq Buffer 2µL

MgCl₂ 1.6µL

10mM dNTPs 0.4µL

10µM 引物HLJFLf3 0.6µL

10µM 引物HLJFLr3 0.6µL

5U/ µL Taq DNA 聚合酶 0.08µL

100ng/µL基因组DNA 1.0 µL

6.根据权利要求4所述的区分三角鲂性别的方法，其特征在于步骤二中PCR扩增条件为：94℃预变性3min；94℃变性30s、56℃退火30s、72℃延伸30s，共30个循环；再72℃延伸5min，4℃保温。