[发明专利]一种棘胸蛙多肽及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种棘胸蛙多肽的制备方法及应用，其中，棘胸蛙多肽的制备方法，包括：将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理，得到脱脂棘胸蛙粉末；向脱脂棘胸蛙粉末加水，混匀，调pH和温度，加入木瓜蛋白酶酶解4h，灭酶，离心取上清，冷冻干燥，得到棘胸蛙多肽。由此，可获得具有抗氧化能力的棘胸蛙多肽，可实现棘胸蛙高附加值的综合利用。

技术领域

本发明涉及生物医学技术领域，具体涉及一种棘胸蛙多肽及其制备方法和应用。

背景技术

棘胸蛙，隶属蛙科、棘蛙属，俗称石蛙、石鸡等，因其肉质细腻且富含丰富的蛋白质、氨基酸、不饱和脂肪酸和葡萄糖，以及钙、磷、铁和多种维生素，被美食家称为“百蛙之王”，具有滋补强身、清心润肺、健肝胃、补虚损，以及解热毒、治疳疾等功效。

近年来关于棘胸蛙种群分布、生态习性、繁殖行为、人工养殖、防病害、营养成分等研究报道较多，尚缺乏对其生物活性的系统研究。

发明内容

为解决上述问题，本发明的实施例提出了一种棘胸蛙多肽的制备方法，其包括以下步骤：

将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理，得到脱脂棘胸蛙粉末；

向脱脂棘胸蛙粉末加水，混匀，调pH和温度，加入木瓜蛋白酶酶解4h，灭酶，离心取上清，冷冻干燥，得到棘胸蛙多肽。

根据本发明实施例的一种棘胸蛙多肽的制备方法，该方法将棘胸蛙粉末经石油醚脱脂后，再用木瓜蛋白酶酶解处理，可获得具有抗氧化能力的棘胸蛙多肽。

可选地，还包括：将所述棘胸蛙多肽经葡聚糖凝胶SephadexG-50柱层析分离后，再经葡聚糖凝胶SephadexG-15柱层析分离。由此，将棘胸蛙多肽经葡聚糖凝胶SephadexG-50柱层析和葡聚糖凝胶SephadexG-15柱层析纯化后，可提高棘胸蛙多肽的抗氧化能力。

可选地，棘胸蛙粉末与石油醚的料液比为1:4。

可选地，将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理48h，每隔8h换一次石油醚溶液，37℃烘干，得到脱脂棘胸蛙粉末。

可选地，脱脂棘胸蛙粉末与水的料液比为1:40。

可选地，木瓜蛋白酶的加入量为1％。

可选地，取棘胸蛙多肽用超纯水配制浓度为50～100mg/mL的溶液，经过葡聚糖凝胶SephadexG-50柱层析分离，上样体积：3mL，流速0.3mL/min，每管3mL，用超纯水进行洗脱3～5个柱体积，根据220nm下的吸光度曲线收集洗脱组分，收集吸光度值较高的组分，分别测定DPPH自由基清除率IC₅₀；取经葡聚糖凝胶SephadexG-50纯化出的DPPH自由基清除率IC₅₀较低的组分，用超纯水配成浓度为25～50mg/mL的溶液，经过葡聚糖凝胶SephadexG-15柱层析分离，上样体积：3mL，流速0.3mL/min，每管3mL，用超纯水进行洗脱3～5个柱体积，根据220nm下的吸光度曲线收集洗脱组分，收集吸光度值较高的组分，分别测定DPPH自由基清除率IC₅₀。

根据本发明的实施例，本发明还提出上述的制备方法制得的棘胸蛙多肽。该棘胸蛙多肽具有较好的抗氧化能力，可实现棘胸蛙高附加值的综合利用。

根据本发明的实施例，本发明还提出上述的棘胸蛙多肽在制备抗氧化剂中的应用，以实现棘胸蛙高附加值的综合利用。

本发明的附加方面和优点将在下面的描述中部分给出，部分将从下面的描述中变得明显，或通过本发明的实践了解到。

附图说明

图1为根据本发明实施例的VC的DPPH自由基清除率；

图2为根据本发明实施例的棘胸蛙酶解产物的DPPH自由基清除率；