[发明专利]一种棘胸蛙多肽及其制备方法和应用在审
申请号: | 202210343762.6 | 申请日: | 2022-03-31 |
公开(公告)号: | CN114592025A | 公开(公告)日: | 2022-06-07 |
发明(设计)人: | 张铃玉;林丽婷;苏德锦;李钰琦;邓凝;吴达仁;周永波;苏进全;李健 | 申请(专利权)人: | 集美大学;福建泉州锦峰生物科技有限公司;福建省健丰生物科技有限公司 |
主分类号: | C12P21/06 | 分类号: | C12P21/06;C07K1/16;A23L33/18 |
代理公司: | 厦门创象知识产权代理有限公司 35232 | 代理人: | 王凤玲;尤怀成 |
地址: | 361000 福*** | 国省代码: | 福建;35 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 棘胸蛙 多肽 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种棘胸蛙多肽的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理,得到脱脂棘胸蛙粉末;
向脱脂棘胸蛙粉末加水,混匀,调pH和温度,加入木瓜蛋白酶酶解4h,灭酶,离心取上清,冷冻干燥,得到棘胸蛙多肽。
2.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,还包括:将所述棘胸蛙多肽经葡聚糖凝胶SephadexG-50柱层析分离后,再经葡聚糖凝胶SephadexG-15柱层析分离。
3.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,棘胸蛙粉末与石油醚的料液比为1:4。
4.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,将棘胸蛙粉末浸泡于石油醚脱脂处理48h,每隔8h换一次石油醚溶液,37℃烘干,得到脱脂棘胸蛙粉末。
5.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,脱脂棘胸蛙粉末与水的料液比为1:40。
6.如权利要求1所述的制备方法,其特征在于,木瓜蛋白酶的加入量为1%。
7.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,取棘胸蛙多肽用超纯水配制浓度为50~100mg/mL的溶液,经过葡聚糖凝胶SephadexG-50柱层析分离,上样体积:3mL,流速0.3mL/min,每管3mL,用超纯水进行洗脱3~5个柱体积,根据220nm下的吸光度曲线收集洗脱组分,收集吸光度值较高的组分,分别测定DPPH自由基清除率IC50;取经葡聚糖凝胶SephadexG-50纯化出的DPPH自由基清除率IC50较低的组分,用超纯水配成浓度为25~50mg/mL的溶液,经过葡聚糖凝胶SephadexG-15柱层析分离,上样体积:3mL,流速0.3mL/min,每管3mL,用超纯水进行洗脱3~5个柱体积,根据220nm下的吸光度曲线收集洗脱组分,收集吸光度值较高的组分,分别测定DPPH自由基清除率IC50。
8.如权利要求1-7中任一项所述的制备方法制得棘胸蛙多肽。
9.如权利要求8所述的棘胸蛙多肽在制备抗氧化剂中的应用。
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