[发明专利]一种李属资源分子标记及其应用有效
| 申请号： | 202210294712.3 | 申请日： | 2022-03-24 |
| 公开（公告）号： | CN114574621B | 公开（公告）日： | 2023-03-17 |
| 发明（设计）人： | 方波;于杰;王元伟;徐益硶;赵倩 | 申请（专利权）人： | 重庆市农业科学院;西南大学;重庆市梁平区良种场 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12N15/11 |
| 代理公司： | 重庆信必达知识产权代理有限公司 50286 | 代理人： | 刘竹 |
| 地址： | 400050 重*** | 国省代码： | 重庆;50 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 资源 分子 标记 及其 应用 | ||
【权利要求书】：
1.一种李属资源的鉴定方法，其特征在于，所述李属资源为大石早生、五月脆、好莱坞和冰糖李，包括如下步骤：
(1)提取待测李属资源样品的基因组DNA，每个李属资源样品各取三份；
(2)利用叶绿体rbcL-accD基因间隔区的序列设计的引物对进行PCR扩增，对扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测；所述引物对序列为：
Flz006：如SEQ ID NO.2所示；
Rlz006：如SEQ ID NO.3所示；
(3)对扩增产物进行测序，对测序结果比对分析后，通过碱基序列的差异进行鉴定。
2.根据权利要求1所述的一种李属资源的鉴定方法，其特征在于，步骤(2)所述的PCR扩增，其反应体系为25μL：DNA模板2μL、上游引物1μL、下游引物1μL、PCR SuperMix(+dye)12.5μL和ddH2O 8.5μL；其反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，58℃退火30s，72℃延伸30s，循环30次；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃修复延伸5min，保存。
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