[发明专利]一对Wxc型糯高粱的ARMS-PCR引物及其分子检测方法在审
| 申请号： | 202210095125.1 | 申请日： | 2022-01-26 |
| 公开（公告）号： | CN114164259A | 公开（公告）日： | 2022-03-11 |
| 发明（设计）人： | 邓锐杰;朱小颖;罗爱民;吴茗花 | 申请（专利权）人： | 四川大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6858 | 分类号： | C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都四合天行知识产权代理有限公司 51274 | 代理人： | 董斌 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一对 wxc 高粱 arms pcr 引物 及其 分子 检测 方法 | ||
1.一对Wxc型糯高粱的ARMS-PCR引物，包括Wxc-F、Wxc-R，其核酸序列分别如SEQ IDNO：1、SEQ ID NO：2所示。
2.Wxc型糯高粱的ARMS-PCR分子检测方法，其特征在于，包括如下步骤：
(1)ARMS-PCR引物对Wxc-F、Wxc-R的设计；
(2)样品总DNA的提取，利用S1的引物进行ARMS-PCR扩增反应；
(3)采用琼脂糖凝胶电泳法检测扩增产物，根据凝胶成像系统上成像判定检测结果，若有条带生成，则表明该样品中含Wxc型糯高粱；若无条带生成，则表明该样品中不含Wxc型糯高粱。
3.根据权利要求2所述的Wxc型糯高粱的ARMS-PCR分子检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述扩增反应的体系：10μL 2×PCR Master，1μL DNA模板，1μL Wxc-F，1μL Wxc-R，SterileddH2O补齐到20μL。
4.根据权利要求2或3所述的Wxc型糯高粱的ARMS-PCR分子检测方法，其特征在于，步骤(2)中，所述扩增反应的条件为：94℃预变性3min，之后进行32个循环的94℃30s、50℃30s、72℃30s，最后进行72℃终止延伸7min。
5.根据权利要求2所述的Wxc型糯高粱的ARMS-PCR分子检测方法，其特征在于，步骤(3)中，所述琼脂糖凝胶电泳判别的方法是：取5μL的ARMS-PCR扩增产物，加入1μL6×Loadingbuffer，混匀，加入到3％的琼脂糖凝胶中，于150V电压下电泳30min，在凝胶成像系统上成像观察结果。
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