[发明专利]DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记及其开发方法与应用

权利要求书

1.一种DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记，其特征在于，分子标记DcBGLU2L在NCBI genebank中的基因检索编号为Loc110095182，通过引物对以石斛RNA反转录的cDNA为模板，采用qRT-PCR扩增来指示其表达水平。

2.根据权利要求1所述的DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记，其特征在于，所述引物对为SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2；

所述的SEQ ID NO.1序列为：5'-CTTTCAGCAAATCAGAATCCCA-3'；

所述的SEQ ID NO.2序列为：5'-ATGCCTGACTGGTTGGTGGA-3'。

3.权利要求1所述的DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记的开发方法，其特征在于，对组织培养中激素处理后的石斛样品进行qRT-PCR基因表达检测，与对照样品进行比较，其表达量与多糖含量呈正相关关系，据此判断多糖含量的变化情况。

4.根据权利要求3所述的DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记的开发方法，其特征在于，所述qRT-PCR基因表达检测具体为，取用少量样品进行微量RNA提取及逆转录成cDNA，采用qRT-PCR方法对DcBGLU2L基因表达水平进行检测和比较。

5.根据权利要求4所述的DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记的开发方法，其特征在于，所述少量样品为50-100mg的植物组织鲜样。

6.根据权利要求4或5所述的DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记的开发方法，其特征在于，所述少量样品为叶片、1cm长的茎、根部组织、圆球体或愈伤组织。

7.根据权利要求3所述的DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记的开发方法，其特征在于，利用RNAi敲低DcBGLU2L的表达，样品中多糖含量相应降低。

8.根据权利要求3所述的DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记的开发方法，其特征在于步骤如下：

步骤1.石斛材料处理；

步骤2.多糖含量测定；

步骤3.cDNA文库制备和转录组测序；

步骤4.转录组数据处理与分析；

步骤5.实时定量qRT-PCR验证；

步骤6.RNAi敲低DcBGLU2L的表达及对应材料中多糖含量测定。

9.权利要求1所述的DcBGLU2L石斛多糖含量分子标记的应用，其特征在于，作为监测多糖含量的分子标记，在监测石斛体内多糖含量、指示石斛体内多糖的积累水平、检测石斛质量、鉴定石斛品质、研究植物激素对石斛活性成分积累的影响及研究植物激素处理下改变化合物积累的潜在机制中的应用。