[发明专利]一种DNA甲基转移酶1的抗原肽及其多克隆抗体

权利要求书

1.一种DNA甲基转移酶1的抗原肽，所述DNA甲基转移酶1的抗原肽的氨基酸序列如SEQID NO.l所示，其对应的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

2.根据权利要求1所述的DNA甲基转移酶1的抗原肽，其特征在于，其核苷酸序列选自猪DNMT1基因预测序列，猪DNMT1基因预测序列的氨基酸序列如SEQ ID NO.3所示，其核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

3.一种由所述DNA甲基转移酶1的抗原肽免疫新西兰大白兔制备得到的多克隆抗体。

4.权利要求3所述的抗DNMT1多克隆抗体的制备方法，包括如下步骤:

a)制备合成肽抗原：人工合成SEQ ID NO.l所示的氨基酸序列，使用KLH载体蛋白进行偶联纯化，得到合成肽抗原；

b)免疫新西兰大白兔：使用生理盐水对抗原肽稀释，按照1:1比例与弗氏佐剂混合乳化后免疫新西兰大白兔，获得包含多克隆抗体的血清；

c)多克隆抗体纯化：采用Protein G亲和层析法对多克隆抗体进行纯化，得到多克隆抗体。

5.根据权利要求4抗DNMT1多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中免疫方式为皮下注射或肌肉注射，抗原肽的每次免疫量500μg。

6.根据权利要求4抗DNMT1多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤b)中免疫中每隔14天进行一次加强免疫，免疫六次后的第7天静脉或心脏采血获得包含多克隆抗体的血清。

7.根据权利要求4抗DNMT1多克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述抗DNMT1多克隆抗体的制备方法中，所述步骤b)中包括抗体效价检测，通过间接ELISA法检测抗体的效价和灵敏度，所述的多克隆抗体的效价大于1:50k，所述抗DNMT1多克隆抗体用含20％甘油的PBS缓冲液储存。

8.一种权利要求3所述的抗DNMT1多克隆抗体的应用，其用于哺乳动物细胞DNMT1蛋白表达检测。

9.根据权利要求8所述的抗DNMT1多克隆抗体的应用，其特征在于，所述的多克隆抗体用于人、猪、猴、牛、犬源的DNMT1蛋白的表达检测。

10.根据权利要求8所述的抗DNMT1多克隆抗体的应用，其特征在于，所述的哺乳动物细胞为HEK 293T细胞、Marc 145细胞、PAM细胞、MDBK细胞、MDCK细胞。