[发明专利]检测GLP1R基因多态性位点SNP分型的引物探针组合、试剂盒及其应用

权利要求书

1.一种检测GLP1R基因多态性位点SNP分型的引物探针组合，其特征在于，检测GLP1R基因多态性位点SNP分型的引物探针组合的正向引物如SEQ ID NO：1所示，反向引物如SEQ IDNO：2所示，探针PA如SEQ ID NO：3所示，探针PG如SEQ ID NO：4所示。

2.包含权利要求1所述的检测GLP1R基因多态性位点SNP分型的引物探针组合的试剂盒。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中含有引物探针组合液；

引物探针组合液中正向引物、反向引物、探针PA、探针PG的浓度比为1∶1∶1∶0.5。

4.根据权利要求2或3所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒中的试剂还包括反应液。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其特征在于，反应液是由0.2体积份Taq DNA聚合酶、10体积份buffer Mix for SNP 3#、3体积份Mega buffer Mix for SNP和3.8体积份ddH₂O配制而得。

6.权利要求2-5中任一项所述的试剂盒在检测GLP1R基因rs6923761多态性位点中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述应用的具体步骤是取待测样本核酸分别与试剂盒中的试剂，振荡混匀，离心，制成待测反应体系，再进行PCR扩增反应，每个反应获得2个扩增曲线图和CT值，再根据所得扩增曲线图和CT值判断待测样本核酸的基因型。

8.根据权利要求7所述的试剂盒，其特征在于，所述待测反应体系为17μL反应液、1μL引物探针组合液和2μL待测样本核酸；

引物探针组合液中正向引物、反向引物、探针PA、探针PG的浓度比为1∶1∶1∶0.5；

反应液是由0.2体积份Taq DNA聚合酶、10体积份buffer Mix for SNP 3#、3体积份Mega buffer Mix for SNP和3.8体积份ddH₂O配制而得。

9.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于，判断待测样本核酸的基因型的标准为：

当FAM的CT值≤38且HEX的CT值＞38/无CT值时，则基因型判定为GG型；

当HEX的CT值≤38且FAM的CT值＞38/无CT值时，则基因型判定为AA型；

当FAM的CT值≤38且HEX的CT值≤38时，则基因型判定为AG型；

当FAM的CT值＞38/无CT值且HEX的CT值＞38/无CT值时，则需复测。

10.根据权利要求7或8所述的应用，其特征在于，PCR扩增反应的条件为5℃预变性2min，再经95℃变性5s、58℃退火15s，共40个循环。