[发明专利]一种制备具有自絮凝能力的大肠杆菌菌株的方法在审
申请号: | 202111508630.6 | 申请日: | 2021-12-10 |
公开(公告)号: | CN114350582A | 公开(公告)日: | 2022-04-15 |
发明(设计)人: | 李翔宇;汪志明;刘洋;余超;陆姝欢;杨艳红 | 申请(专利权)人: | 嘉必优生物技术(武汉)股份有限公司 |
主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12N15/54;C12N15/70;C12P19/26;C12P19/18;C12R1/19 |
代理公司: | 北京路浩知识产权代理有限公司 11002 | 代理人: | 朱芳 |
地址: | 430000 湖北省武*** | 国省代码: | 湖北;42 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 制备 具有 絮凝 能力 大肠杆菌 菌株 方法 | ||
1.一种制备具有自絮凝能力的大肠杆菌菌株的方法,其特征在于,包括:
将重组唾液酸糖基转移酶基因转化至大肠杆菌中;
所述重组唾液酸糖基转移酶基因包括6’唾液酸糖基转移酶基因和3’唾液酸糖基转移酶基因,所述6’唾液酸糖基转移酶基因缺失40%~100%的基因片段。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述重组唾液酸糖基转移酶基因由6’唾液酸糖基转移酶基因缺失从5’端起第1位至593~893位中任一位的核苷酸序列,后在缺失位置插入所述3’唾液酸糖基转移酶基因。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述重组唾液酸糖基转移酶基因由包括如下步骤的方法制备得到:
采用SacI/BamHI酶切所述6’唾液酸糖基转移酶基因,在酶切位点插入所述3’唾液酸糖基转移酶基因。
4.根据权利要求1-3任一项所述的方法,其特征在于,所述6’唾液酸糖基转移酶基因包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列;和/或,所述3’唾液酸糖基转移酶基因包括如SEQ IDNO.2所示的核苷酸序列。
5.一种核酸,其特征在于,所述核酸包括重组唾液酸糖基转移酶的基因序列,所述重组唾液酸糖基转移酶的基因序列包括6’唾液酸糖基转移酶基因和3’唾液酸糖基转移酶基因,所述6’唾液酸糖基转移酶基因缺失40%~100%的基因片段;
所述6’唾液酸糖基转移酶基因包括如SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列;所述3’唾液酸糖基转移酶基因包括如SEQ ID NO.2所示的核苷酸序列。
6.根据权利要求5所述的核酸,其特征在于,所述重组唾液酸糖基转移酶基因由6’唾液酸糖基转移酶基因缺失从5’端起第1位至593~893位中任一位的核苷酸序列,后在缺失位置插入所述3’唾液酸糖基转移酶基因;
优选地,所述重组唾液酸糖基转移酶基因由包括如下步骤的方法制备得到:
采用SacI/BamHI酶切所述6’唾液酸糖基转移酶基因,在酶切位点插入所述3’唾液酸糖基转移酶基因;
进一步优选地,所述核酸包括如SEQ ID NO.3所示的核苷酸序列。
7.一种生物材料,其特征在于,所述生物材料包括权利要求5或6所述的核酸,所述生物材料为表达盒、载体、工程菌或转基因细胞中的一种。
8.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求5或6所述的核酸,和/或权利要求7所述的生物材料。
9.权利要求5或6所述的核酸,或权利要求7所述的生物材料,或权利要求8所述的试剂盒在制备具有自絮凝能力的微生物中的应用;
所述微生物优选为大肠杆菌、酵母或枯草芽孢杆菌中的一种或多种。
10.权利要求5或6所述的核酸,或权利要求7所述的生物材料,或权利要求8所述的试剂盒在提高微生物生产唾液酸基低聚糖的效率中的应用;
所述微生物优选为大肠杆菌、酵母或枯草芽孢杆菌中的一种或多种。
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