[发明专利]一种用于检测蚕豆抗豆象品种的SSR标记及其应用有效
| 申请号: | 202111277001.7 | 申请日: | 2021-10-29 |
| 公开(公告)号: | CN114032321B | 公开(公告)日: | 2023-08-18 |
| 发明(设计)人: | 沙爱华;陈银华;孙虎;公丹;朱秀秀;蒋浩中;向艳涛;魏正欣 | 申请(专利权)人: | 海南大学 |
| 主分类号: | C12Q1/6895 | 分类号: | C12Q1/6895;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司: | 广州三环专利商标代理有限公司 44202 | 代理人: | 侯华民 |
| 地址: | 570100 海*** | 国省代码: | 海南;46 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 检测 蚕豆 抗豆象 品种 ssr 标记 及其 应用 | ||
1.一种SSR标记的引物对用于辅助鉴定抗豆象蚕豆品种的应用,其特征在于,包括以下步骤:以蚕豆基因组DNA为模板,采用所述引物对进行PCR扩增和凝胶电泳,鉴定蚕豆是否为抗豆象的蚕豆品种;
所述引物对的序列为:
上游引物:核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示:5’- AGAAAGGAAAACCTCTCCCG -3’;
下游引物:核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示:5’- GTGCTTGATTTGGGGGAGTA -3’。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述PCR扩增的反应体系包括:上游引物和下游引物各0.6μL,模板DNA为1.5μL,ddH2O为9.4μL,dNTP为0.3μL,10×buffer为1.5μL,Mg2+为0.9μL,热稳定DNA聚合酶为0.2μL。
3.根据权利要求1所述的应用,其特征在于,所述PCR扩增的程序包括:盖温为105℃,95℃恒温预变性5min后,进行35个循环,每个循环的条件为:95℃变性30s、55℃退火30s、72℃延伸45s,循环后在72℃下延伸10min,最后冷却至4℃。
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