[发明专利]一种大黄鱼遗传性别相关的分子标记、鉴定引物及其用途有效
| 申请号： | 202111244273.7 | 申请日： | 2021-10-26 |
| 公开（公告）号： | CN113897439B | 公开（公告）日： | 2023-10-24 |
| 发明（设计）人： | 王志勇;崔瑜 | 申请（专利权）人： | 集美大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6888 | 分类号： | C12Q1/6888;C12Q1/6879;C12Q1/6858;C12N15/11 |
| 代理公司： | 厦门市精诚新创知识产权代理有限公司 35218 | 代理人： | 秦华 |
| 地址： | 361000 福*** | 国省代码： | 福建;35 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 大黄鱼 遗传 性别 相关 分子 标记 鉴定 引物 及其 用途 | ||
1.一种大黄鱼遗传性别相关的分子标记，其特征在于，当Dmrt1基因完整ORF全长为915bp时，第5外显子上第84位核苷酸发生了C/A的变异，第87位核苷酸发生了G/A的变异；当Dmrt1基因第5外显子首位有3个碱基的插入，即完整ORF全长为918bp时，第87位核苷酸发生了C/A的变异，第90位核苷酸发生了G/A的变异。
2.如权利要求1所述分子标记，其特征在于，当Dmrt1基因第5外显子上第84位或第87位核苷酸为C即基因型为C/C，同时第87位或第90位核苷酸为G即基因型为G/G的个体，为遗传雌性即性染色体组型是XX的大黄鱼；Dmrt1基因第5外显子上第84位或第87位核苷酸同时存在C和A即基因型为A/C，且第87位或第90位核苷酸同时存在G和A即基因型为A/G，为遗传雄性即性染色体组型是XY的大黄鱼；Dmrt1基因第5外显子上第84位或第87位核苷酸只存在A即基因型为A/A，同时第87位或第90位核苷酸只存在A即基因型为A/A，为超雄性即性染色体组型是YY的大黄鱼。
3.一种用于大黄鱼遗传性别鉴定的引物对，其特征在于，所述引物对的核苷酸序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2，SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4所示。
4.一种用于大黄鱼遗传性别鉴定的检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括权利要求3所述引物对。
5.一种用权利要求4所述试剂盒或权利要求3所述引物对进行大黄鱼遗传性别鉴定的方法，其特征在于，使用权利要求3所述引物对或权利要求4试剂盒中的引物对，对待检测大黄鱼进行所述分子标记的检测，以确定大黄鱼的遗传性别。
6.如权利要求5所述方法，其特征在于，利用权利要求3所述引物对或权利要求4试剂盒中的引物对，对待测大黄鱼基因组DNA进行PCR扩增；
检测扩增片段的数量和长度，以及，
基于所述扩展片段的数量和长度，确定所述待测大黄鱼的性染色体组型及遗传性别；
当扩增结果在100bp～250bp区域内只有一条202bp的条带、没有249bp的条带时，所述待测个体为遗传性别是雌性即性染色体组型是XX的大黄鱼；而扩增结果在100bp～250bp区域内有两条带，且片段长度分别为202bp和249bp时，所述待测个体为遗传性别是雄性即性染色体组型是XY的大黄鱼；若扩增结果在100bp～250bp区域内只有一条长度为249bp的条带时，所述待测个体为遗传性别是超雄性即性染色体组型是YY的大黄鱼。
7.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的体系为：当反应总体积为10μL时，具体反应体系为5μL 2×EasyTaq PCR SuperMix，上下游引物各1μL，30ng/μL 的DNA模板1μL，加ddH2O补齐至10μL。
8.如权利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR扩增的程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，60℃退火20s，72℃延伸20s，30个循环；72℃总延伸5min。
9.权利要求1或2所述分子标记，权利要求3所述引物对或权利要求4试剂盒，在大黄鱼育种中的用途。
10.一种大黄鱼辅助育种方法，其特征在于，所述方法包括：通过权利要求5-8任一项所述方法来检测权利要求1或2所述分子标记，以确定待测大黄鱼的遗传性别。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于集美大学，未经集美大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202111244273.7/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
