[发明专利]胶原蛋白7的组合物及其使用方法

说明书

本公开涉及包含胶原蛋白7的组合物和使用其治疗DEB的方法。

本申请是申请日为2016年12月21日，申请号为201680075057.5，发明名称为“胶原蛋白7的组合物及其使用方法”的申请的分案申请。

相关申请的交叉引用

本申请要求2015年12月23日提交的美国临时专利申请号62/387,241；2016年1月14日提交的美国临时专利申请号62/278,816；以及2016年2月9日提交的美国临时专利申请号62/293,209的益处，并依赖于其申请日，其全部公开内容通过引用的方式并入本文。

领域

本发明涉及组合物(例如药物组合物)，并且更具体地涉及胶原蛋白7的组合物和使用其治疗营养不良性大疱性表皮松解症(dystrophic epidermolysis bullosa)的方法。

背景

胶原蛋白VII(C7)蛋白质是一种结构蛋白质，其中C7是形成能够使表皮和真皮连接的固着性原纤维的结构和功能前体。C7单体组装成含有一个NC-1结合区和一个NC-2结合区的约900kDa的同源三聚体。同源三聚体通过α螺旋线圈保持在一起。由同源三聚体，这些C7蛋白质前体排列成反向平行二聚体，分子量增加至1.8mDa。横向组装反向平行二聚体导致固着性原纤维的形成。rC7蛋白表现出“粘性”，以及在较高蛋白质浓度下沉淀的倾向，特别是在PBS缓冲液中。

缺乏C7导致这些固着性原纤维的异常减少和称为营养不良性大疱性表皮松解症(DEB)的状况。EB包括一组分子多样性疾病，其特征在于对皮肤的轻微机械创伤后发展出水疱。(1)严重程度、皮外表现和临床过程取决于EB的类型；然而，几乎所有患者都会出现起水疱或皮肤破裂。(2)

营养不良性大疱性表皮松解症(EBB)是EB的一种形式，其特征在于愈合时发展出瘢痕。(3)在DEB患者中，由于皮肤极其脆弱的性质，即使轻微机械创伤也会引发起水疱。这导致起水疱、愈合和再次起水疱的长期循环，使患者遭受伤口疼痛和使上皮组织的疤痕虚弱。DEB无法治愈，并且管理集中于支持性护理。

营养不良性EB是由Col7al基因突变引起的，该基因编码胶原蛋白VII(C7)的α链，该蛋白质是形成将基底膜锚定在下层真皮上的固着性原纤维所必需的蛋白质。(4)这种状况以显性形式(DDEB)或隐性形式(RDEB)遗传，RDEB通常具有更严重的表型。(5)

DEB小鼠模型(Col7a1-/-)对Col7al基因具有靶向灭活作用，引起严重的水疱，其模拟严重的人RDEB的组织学和超微结构表现。(6)这些小鼠在真皮-表皮基底膜区(BMZ)没有可检测的胶原蛋白VII，完全缺乏固着性原纤维，且出生时在它们的腹侧面上出现大量的皮肤水疱并且在它们的爪子和颈部出现出血性水疱，通常观察到在生命的第一周内死亡。

概述

本公开涉及包含胶原蛋白7的组合物和制备这种组合物的方法。在某些实施方案中，组合物包含重组胶原蛋白7、磷酸钠、柠檬酸钠、氯化钠、精氨酸、糖和表面活性剂。可以从该组合物中排除磷酸钠、柠檬酸钠、氯化钠、精氨酸、糖或表面活性剂中的一种或多种。

在某些实施方案中，糖是蔗糖。在某些实施方案中，表面活性剂是聚山梨酸酯，例如聚山梨酸酯20或聚山梨酸酯80。

在某些实施方案中，磷酸钠以100mM至1mM、50mM至5mM、25mM至5mM、10mM至5mM、10mM至1mM或约10mM的量存在。

在某些实施方案中，柠檬酸钠以100mM至1mM、50mM至1mM、25mM至1mM、10mM至1mM、5mM至1mM或约5mM的量存在。

在某些实施方案中，氯化钠以200mM至10mM、100mM至20mM、80mM至50mM或约70mM的量存在。