[发明专利]鉴定烟草野火菌生理小种类型的分子标记、引物对及其应用在审
| 申请号: | 202111169206.3 | 申请日: | 2021-09-28 |
| 公开(公告)号: | CN113930530A | 公开(公告)日: | 2022-01-14 |
| 发明(设计)人: | 李若;乔婵;李尊强;万秀清;杨鹏九;郭兆奎;元野;潘洪杏;崔晓;贺国强;孙宏伟;焦玉生;王春军 | 申请(专利权)人: | 中国烟草总公司黑龙江省公司牡丹江烟草科学研究所 |
| 主分类号: | C12Q1/689 | 分类号: | C12Q1/689;C12Q1/686;C12N15/11;C12R1/38 |
| 代理公司: | 北京正理专利代理有限公司 11257 | 代理人: | 赵晓丹 |
| 地址: | 150076 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 鉴定 烟草 野火 生理 种类 分子 标记 引物 及其 应用 | ||
1.一种鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型的引物对,其特征在于,所述引物对由上游引物WFF1和下游引物WFR1组成:
所述上游引物WFF1为SEQ ID NO.1所示的单链DNA分子;所述下游引物WFR1为SEQ IDNO.2所示的单链DNA分子。
2.一种鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型的试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包含权利要求1所述的引物对。
3.权利要求1所述的引物对或权利要求2所述的试剂盒在如下任一中的应用:
A1)制备用于鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型的产品;
A2)鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型;
A3)制备用于鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌是否为烟草野火菌0号生理小种或3号生理小种的产品;
A4)鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌是否为烟草野火菌0号生理小种或3号生理小种;
A5)制备用于鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌是否为烟草野火菌1号生理小种或2号生理小种的产品;
A6)鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌是否为烟草野火菌1号生理小种或2号生理小种。
4.一种鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型的方法,其特征在于,包括如下步骤:
以待测烟草野火菌为模板,采用权利要求1所述的引物对或权利要求2所述的试剂盒进行菌落PCR反应,得到PCR产物;
若所述PCR产物中出现大小为500-750bp的条带,则将待测烟草野火菌判定为或候选为烟草野火菌0号生理小种或3号生理小种;若PCR产物未出现大小为500-750bp的条带,则将待测烟草野火菌判定为或候选为烟草野火菌1号生理小种或2号生理小种。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述500-750bp的条带为615bp的条带。
6.用于鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型的分子标记,其特征在于,所述分子标记为SEQ ID NO.3所示的DNA分子。
7.权利要求6所述的分子标记在如下任一中的应用:
B1)制备用于鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型的产品;
B2)鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型;
B3)制备用于鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌是否为烟草野火菌0号生理小种或3号生理小种的产品;
B4)鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌是否为烟草野火菌0号生理小种或3号生理小种;
B5)制备用于鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌是否为烟草野火菌1号生理小种或2号生理小种的产品;
B6)鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌是否为烟草野火菌1号生理小种或2号生理小种。
8.一种鉴定或辅助鉴定待测烟草野火菌生理小种类型的方法,其特征在于,包括如下步骤:
检测待测烟草野火菌的基因组DNA中是否存在权利要求6所述的分子标记,如果存在权利要求6所述的分子标记,则待测烟草野火菌为或候选为烟草野火菌0号生理小种或3号生理小种;如果不存在权利要求6所述的分子标记,则待测烟草野火菌为或候选为烟草野火菌1号生理小种或2号生理小种。
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