[发明专利]一种丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒及其制备方法和应用

说明书

本发明公开了一种丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒及其制备方法和应用。由丹参酮脂溶性成分有机溶液与天然NaCas溶液或酶解NaCas溶液在常温下反应后经纯化、低温处理后获得，丹参酮脂溶性成分为丹参酮IIA、丹参酮I及隐丹参酮中任意一种，酶解NaCas为胰蛋白酶酶解后的NaCas，所述常温为20℃～35℃。本发明可以提高丹参酮脂溶性成分稳定性和水溶性，同时又可以提供牙齿再矿化和人体所需矿物质离子，增强丹参酮脂溶性成分抗变异链球菌活性和抗氧化活性。

技术领域

本发明属于医药药剂学研究领域，尤其涉及丹参酮脂溶性成分与蛋白多肽制备水溶性纳米粒的方法及应用，具体为一种丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒及其制备方法和应用。

背景技术

龋齿(蛀牙)是人类的多发病之一，世界卫生组织(WHO)将其列为危害人类健康的三大疾病之一。国内外大量研究数据表明，龋齿是一种由变异链球菌和边缘性链球菌引起的细菌感染性疾病，而变异链球菌已被国内外学者公认为是最重要和最主要的致龋病原菌。

氟化物是目前预防龋病最常用的制剂，但是随着氟化物的使用，越来越多的问题也凸显了出来。如含氟牙膏中氟浓度的稳定性、长期使用含氟产品导致的细菌耐氟性、细菌基因组发生突变等，这些因素导致氟化物的防龋效果下降；氟化物使用不当也会导致生物体急性、慢性中毒等，给使用者的健康带来了巨大的威胁，这些因素极大地阻碍了氟化物在防龋领域的推广。在抗生素抗龋齿的应用中也存在着同样的问题。氟化物和抗生素的弊端导致市场迫切的需要稳定性好、对致龋细菌杀伤能力强同时对人体近乎无害的治疗和预防龋齿的产品，当做含氟产品和抗生素的替代物。

近年研究发现，有些传统中草药(如丹参)具有抑制细菌生长和细菌黏附的能力，可以达到与抗生素相似的抗菌效果。在我国，丹参与金银花，蜂胶，桔梗，甘草等在中药研究中一直被认为具有良好的抗菌、消炎作用，它们的复合制剂在口腔消炎抗菌方面已有实际应用。目前市场上复合试剂中的丹参活性成分主要是粗丹参酮，目前尚未见应用精提粗丹参酮中的脂溶性成分作为主要活性成分应用于口腔龋齿疾病治疗的报道。

丹参提取物在体外抗菌、抗炎症方面被证明具有疗效。但是，丹参提取物在水中的溶解度极差，仅为10^-7～10^-5mol/L；丹参提取物的稳定性也非常差，在外界条件下会分解失活。这使得传统的丹参制剂难以被人体吸收，存在着生物利用度极低的问题。所以，探寻提高丹参提取物水溶性复合物的制备方法，提高丹参提取物的水溶性和稳定性是一项很有前景的研究。

发明内容

本发明的目的是提供一种可以负载丹参酮脂溶性成分，提高其稳定性和水溶性，同时又可以提供牙齿再矿化和人体所需矿物质离子，增强丹参酮脂溶性成分抗变异链球菌活性和抗氧化活性的丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒。为了实现该目的，本发明的方案如下：

提供一种丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒，由丹参酮脂溶性成分有机溶液与NaCas溶液或酶解NaCas溶液在常温下反应后经纯化、低温处理后获得，所述丹参酮脂溶性成分为丹参酮IIA、丹参酮I及隐丹参酮中任意一种，所述酶解NaCas为胰蛋白酶酶解后的NaCas，所述常温为20℃～35℃。

通过合成该纳米粒子，提高丹参酮脂溶性成分的稳定性和水溶解性，同时让丹参酮脂溶性成分更容易、更稳定被生物体吸收利用；NaCas可以稳定口腔中的Ca²⁺，为牙齿再矿化提供所需的矿物质离子。酶解蛋白与丹参酮脂溶性成分结合之后，可以得到1+12的效果。合成的纳米粒具有良好的稳定性和水溶解性，在抗菌性能和抗氧化能力方面都有提升。

进一步的优化方案，所述丹参酮脂溶性成分有机溶液的溶剂为乙醇，所述NaCas溶液或酶解NaCas溶液的溶剂为水或者中碱性缓冲液。常温反应中，丹参酮脂溶性成分与酶解NaCas的质量比为1:10至1:50。所述的胰蛋白酶为猪胰蛋白酶，酶活力为25700U/mg。

如果采用酶解NaCas溶液具体制备可采取如下制备方法：