[发明专利]一种丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒及其制备方法和应用

权利要求书

1.一种丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒，其特征在于：由丹参酮脂溶性成分有机溶液与NaCas溶液或酶解NaCas溶液在常温下反应后经纯化、低温处理后获得，所述丹参酮脂溶性成分为丹参酮IIA、丹参酮I及隐丹参酮中任意一种，所述酶解NaCas为胰蛋白酶酶解后的NaCas，所述常温为20℃～35℃。

2.根据权利要求1所述的丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒，其特征在于：所述丹参酮脂溶性成分有机溶液的溶剂为乙醇，所述NaCas溶液或酶解NaCas溶液的溶剂为水或者中碱性缓冲液。

3.根据权利要求1所述的丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒，其特征在于：常温反应中，丹参酮脂溶性成分与NaCas溶液或酶解NaCas的质量比为1:10～1:50。

4.根据权利要求1所述的丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒，其特征在于：所述的胰蛋白酶为猪胰蛋白酶，酶活力为25700U/mg。

5.权利要求1～4所述的丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒的制备方法，其特征在于：由丹参酮脂溶性成分有机溶液与酶解NaCas溶液在常温下反应后经纯化、低温处理后获得，包含以下制备步骤：

1)NaCas溶液的制备：将NaCas溶于中碱性PBS缓冲液中，搅拌溶解，配制成浓度为10.0～500.0mg/mL的NaCas溶液；所述中碱性PBS缓冲液的pH值为6.0～11.0；

2)酶解NaCas粗溶液的制备：将胰蛋白酶加入步骤1)NaCas溶液中，在38℃～80℃，采用磁力搅拌机在转速为300～1000rpm条件下搅拌，酶解4～24h，制备酶解NaCas粗溶液；

3)酶解NaCas溶液的纯化：将步骤2)中的酶解NaCas粗溶液放置于沸水浴中加热，灭活胰蛋白酶；在1～30℃，4000rpm～7000rpm条件下进行离心，取上清，弃沉淀，得到酶解NaCas纯溶液；

4)丹参酮脂溶性成分有机溶液的制备：将丹参酮脂溶性成分溶解于无水乙醇中得到浓度为0.1～1.0mg/mL的丹参酮脂溶性成分有机溶液；

5)酶解NaCas@丹参酮粗溶液的制备：将步骤4)中的丹参酮脂溶性成分有机溶液滴加入步骤3)中的酶解NaCas纯溶液中，边滴加边通过磁力搅拌机搅拌，搅拌速率为200rpm～1200rpm，滴加完之后，设定温度为20℃～35℃，速率200rpm～1200rpm，磁力搅拌让溶液自组装2～24h，得到酶解NaCas@丹参酮粗溶液；

6)酶解NaCas@丹参酮溶液的纯化：将步骤5)中制备的酶解NaCas@丹参酮粗溶液置于旋转蒸发仪上，温度为30℃～80℃，转速为10rpm～100rpm，进行旋蒸，除去溶液中存在的有机试剂；之后在1～30℃，2000g～6000g条件下，对溶液进行离心，取上清溶液，得到酶解NaCas@丹参酮纯溶液；

7)纳米粒的获得：对步骤6)中酶解NaCas@丹参酮纯溶液进行低温冷冻处理，温度范围是0～-80℃，获得酶解NaCas@丹参酮纳米粒，之后用冷冻干燥机将酶解NaCas@丹参酮纳米粒冷冻干燥直到固体冰块全部转换成粉末即为所述丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒成品。

6.根据权利要求5所述的丹参酮及蛋白多肽复合纳米粒的制备方法，其特征在于：步骤5)中丹参酮脂溶性成分与酶解NaCas的质量比为1:10至1:50。