[发明专利]嵌合抗原受体、组合物以及方法

说明书

本公开描述了用于在自然杀伤(NK)细胞中表达的嵌合抗原受体，包括经修饰以表达嵌合抗原受体的NK细胞(和/或iPSC)的药物组合物，以及涉及这些嵌合抗原受体的方法。通常，所述嵌合抗原受体包括包含抗原识别区的胞外结构域、与该胞外结构域连接的跨膜结构域，以及与该跨膜结构域连接的胞内结构域。所述胞内结构域可包括激活NK细胞的信号传导肽。

相关申请的交叉引用

本申请是申请号为201680008013.0的中国专利申请的分案申请。本申请要求2015年1月29日提交的美国临时专利申请62/109,281的的优先权，通过引用将其并入本文。

发明内容

在一个方面，本公开描述了用于在自然杀伤(NK)细胞中表达的嵌合抗原受体。通常，所述嵌合抗原受体包括包含抗原识别区的胞外结构域、连接至所述胞外结构域的跨膜结构域，以及连接至所述跨膜结构域的胞内结构域。所述胞内结构域可包含激活NK细胞的信号传导肽(signaling peptide)。

在一些实施方式中，所述抗原识别结构域可特异性地结合与疾病相关的抗原。

在一些实施方式中，所述抗原识别结构域可特异性地结合肿瘤抗原。

在一些实施方式中，所述胞外结构域还可包括信号肽(signal peptide)或前导序列(leader sequence)和/或间隔序列(spacer)。

在一些实施方式中，所述胞内结构域可包括诸如2B4、DAP10、DAP12、IL21R、CD137(41BB)或CD3ζ的NK细胞膜结合信号接头蛋白(NK cell membrane-bound signalingadaptor protein)的信号传导结构域(signaling domain)。

在一些实施方式中，所述跨膜结构域可包括诸如CD16、NKp44、NKp46或NKG2D的在NK细胞中表达的自然细胞毒性受体(natural cytotoxicity receptor)的跨膜区。

在另一方面，本公开描述了包括被修饰以便表达上文总结的嵌合抗原受体的任何实施方式的NK细胞(和/或iPSC)的药物组合物。

在另一方面，本公开描述了向有病况(condition)的受试者提供免疫治疗的方法。通常，该方法包括将上文总结的治疗性组合物施用于该受试者，其中所述嵌合抗原受体的抗原识别区特异性地结合与该病况相关的抗原。

以上的总结无意描述本发明的每个公开的实施方式或者每种实践。以下的说明书更具体地例举了阐释性实施方式。在该申请的若干处，通过列出实施例来提供指导，这些实施例可以以各种组合使用。每种情形下，所给出的列表仅用作代表性组，而不应解释为排他性列表。

附图简要说明

图1.(A)示例性自然细胞毒性受体以及这些受体与它们配体的结合对NK细胞脱颗粒和极化以及靶细胞杀伤的影响。(B)自然细胞毒性受体的代表性实例和它们相应的信号接头。(C)用在iPSC衍生的NK细胞中的第三代嵌合T细胞抗原受体构建体。

图2.(A)NK激活CAR(NK-activating CAR)的一般化示意图。(B)新型嵌合抗原受体构建体的示意图。将嵌合抗原受体克隆进pkt2载体，该载体含有与SB100X转座酶一起使用的IR/DR、mCAGs启动子、嵌合抗原受体(CAR)序列、内部核糖体进入位点(IRES)，以及GFP:Zeo选择标记。嵌合抗原受体片段从UniProt获得，并通过gBlock合成和传统限制酶克隆(IDT)进行组装。