[发明专利]一种产胍基乙酸的重组枯草芽孢杆菌及其构建方法

权利要求书

1.重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，表达Amycolatopsis kentuckyensis来源的甘氨酸脒基转移酶AGAT，并敲除基因组中的gcvP和/或argI基因；编码所述甘氨酸脒基转移酶AGAT的基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.12所示。

2.根据权利要求1所述的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，利用不同强度的启动子表达所述甘氨酸脒基转移酶AGAT；所述不同强度的启动子为P_xpac、P_ycec、P_lytR、P_sdhB、P₄₃、P_odhA、P₃₃₃、P_yvyD、P_veg或P₅₆₆；所述P_xpac、P_ycec、P_lytR、P_sdhB、P₄₃、P_odhA、P₃₃₃、P_yvyD、P_veg或P₅₆₆的核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1~10所示。

3.根据权利要求1或2所述的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，所述gcvP基因的Gene ID为938549；所述argI基因的Gene ID为937760。

4.根据权利要求3所述的重组枯草芽孢杆菌，其特征在于，以pHT01质粒为表达载体。

5.一种生产胍基乙酸的方法，其特征在于，以权利要求1-4任一所述重组枯草芽孢杆菌为发酵菌株，以甘氨酸和精氨酸为底物，发酵生产胍基乙酸。

6.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，所述甘氨酸和精氨酸在反应体系中的浓度相同，为15~25 g/L；所述重组枯草芽孢杆菌在反应体系中的OD₆₀₀为55~65。

7.根据权利要求5所述的方法，其特征在于，反应体系中含有35~45 g/L葡萄糖，10~15g/L酵母粉，5~10 g/L胰蛋白胨，5~10 g/L硫酸铵，10~15 g/L三水合磷酸氢二钾，2~5 g/L磷酸二氢钾，1~5 g/L氯化镁，5~10 g/L尿素。

8.根据权利要求5~7任一所述的方法，其特征在于，在25~40℃条件下反应24~48 h。

9.权利要求1~4任一所述枯草芽孢杆菌在生产胍基乙酸中的应用。