[发明专利]一种用于检测红细胞储存损伤生物标志物、应用、检测方法及试剂盒在审
申请号: | 202110831023.7 | 申请日: | 2021-07-22 |
公开(公告)号: | CN113584153A | 公开(公告)日: | 2021-11-02 |
发明(设计)人: | 张怡宇 | 申请(专利权)人: | 深圳市龙华区中心医院 |
主分类号: | C12Q1/6883 | 分类号: | C12Q1/6883;C12Q1/6851;C12N15/113 |
代理公司: | 北京轻创知识产权代理有限公司 11212 | 代理人: | 尉保芳 |
地址: | 518131 广东省深*** | 国省代码: | 广东;44 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 用于 检测 红细胞 储存 损伤 生物 标志 应用 方法 试剂盒 | ||
1.一种用于检测红细胞储存损伤的生物标志物,其特征在于,所述生物标志物为核苷酸序列如SEQ ID No:1所示的hsa_circ_0012134。
2.一种如权利要求1所述的生物标志物在检测红细胞储存损伤中的应用。
3.一种红细胞储存损伤检测方法,其特征在于,所述检测方法通过检测如权利要求1所述的生物标志物在红细胞中的相对表达量判断红细胞的储存损伤程度。
4.根据权利要求3所述一种红细胞储存损伤检测方法,其特征在于,所述生物标志物的相对表达量越高,红细胞的储存损伤越严重。
5.根据权利要求3所述一种红细胞储存损伤检测方法,其特征在于,包括以下步骤:
1)提取红细胞中的总RNA;
2)依次对所述总RNA进行DNA消化反应和线性RNA消化反应,得到总circRNA;
3)根据步骤2)中得到的总circRNA合成cDNA;
4)对所述步骤3)中得到的所述cDNA进行扩增,得到所述生物标志物hsa_circ_0012134的相对表达量;
5)根据所述生物标志物hsa_circ_0012134的相对表达量判断红细胞的储存损伤程度。
6.根据权利要求5所述一种红细胞储存损伤检测方法,其特征在于,所述步骤3)中扩增采用的引物为针对所述hsa_circ_0012134生物标志物的特异性引物。
7.根据权利要求6所述一种红细胞储存损伤检测方法,其特征在于,所述引物包括如SEQ ID No:2所示的上游引物和如SEQ ID No:3所示的下游引物。
8.一种检测红细胞储存损伤的qPCR试剂盒,其特征在于,所述qPCR试剂盒包括如权利要求6或7所述的引物、SYBR Premix Ex TaqⅡ反应体系以及内参基因扩增引物。
9.根据权利要求8所述一种检测红细胞储存损伤的qPCR试剂盒,其特征在于,所述内参基因为Beta-actin;所述内参基因扩增引物包括如SEQ ID No 4所述的上游引物和如SEQID No 5所述的下游引物。
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