[发明专利]一种用于鉴定茶枝柑的InDel分子标记及其应用

说明书

本发明公开了一种用于鉴定茶枝柑的InDel分子标记，其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。本发明还公开了用于扩增所述InDel分子标记的引物，包括正向引物和反向引物，核苷酸序列分别如SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3所示。本发明提供的分子标记为鉴别广陈皮与陈皮提供了有效的分子工具，利用本发明可以简便高效地鉴定广陈皮与陈皮，整顿行业乱象，对陈皮产业的规范和稳定发展具有重要意义。

技术领域

本发明属于分子生物学领域，涉及一种用于鉴定茶枝柑的InDel分子标记，本发明还涉及该分子标记的引物以及一种鉴定茶枝柑的方法。

背景技术

陈皮为芸香科植物橘(Citrus reticulata Blanco)及其栽培变种的干燥成熟果皮，具理气健脾、燥湿化痰、疏肝利胆等多种功效^[1]。在《中国药典》中已明确注明由广东新会地区广泛种植的茶枝柑(C.reticulata‘Chachi’)制成的为广陈皮，而由其他品种如大红袍(C.reticulata‘Dahongpao’)、温州蜜柑(C.reticulata‘Unshiu’)、福橘(C.reticulata‘Tangerina’)等制成的为陈皮^[2]。目前普遍认为广陈皮具有比普通陈皮品质更好^[3]。

广陈皮作为广东省十大道地药材之一，应用范围广泛，且药食同源，具有优良的食用价值。作为地理标志保护产品，新会广陈皮为当地创造和带动了极大的产业发展和经济创收。然而由于广陈皮与普通陈皮具有相似的外观特征，且在炮制后无法经肉眼进行区分，导致以次充好现象，严重扰乱市场秩序，但目前尚无辨别广陈皮真伪的标准，故亟需开发一种简单有效的技术手段。

分子标记技术如SCoT、SSR、ISSR等已应用于柑橘种质资源遗传多样性评价和遗传图谱构建等工作^[4,5,6]，但针对茶枝柑及广陈皮的分子标记数量有限，尚无相关报道用于区分广陈皮与普通陈皮的InDel分子标记，且目前已知的其他分子标记，如SCoT分子标记^[4]和ISSR分子标记^[7]等，PCR扩增结果均会出现多态性条带，其区分结果不如InDel分子标记简单明晰。

参考文献：

[1]刘玉芳,温志佳,邹婉霞,等.南药广陈皮道地性研究进展[J].中药材,2019,(08):249-253.

[2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].中国医药科技出版社,2015.

[3]Duan L,Guo L,Dou L L,et al.Discrimination of Citrus reticulataBlanco and Citrus reticulata'Chachi'by gas chromatograph-mass spectrometrybased metabolomics approach[J].Food Chemistry,2016,212(dec.1):123-127.

[4]席秀利,黄海波,楼步青,等.SCoT分子标记对茶枝柑及近缘种遗传多态性分析[J].中草药,2018,(10):2426-2431.

[5]李映志.宽皮柑橘(Citrus reticulate Blanco)的遗传多样性及系统发育研究[D].华中农业大学,2006.

[6]席秀利.茶枝柑及近缘种的分子鉴别研究[D].广州中医药大学,2017.

[7]邓锋,林向华,梁蔚阳.利用ISSR分子法标记鉴别新会茶枝柑[J].广东药学院学报,2012,28(004):396-399.

发明内容

本发明的目的是提供一种用于鉴定茶枝柑的InDel分子标记，该标记可用于区分广陈皮和陈皮，与其它标记相比，InDel标记具有简单明晰等优点。本发明还提供用于扩增该标记的引物以及鉴定茶枝柑的方法。