[发明专利]LncRNA ANRIL在儿童急性淋巴细胞白血病中的临床应用

说明书

本发明属于基因技术领域，公开了一种LncRNA ANRIL在儿童急性淋巴细胞白血病中的临床应用，调控基因的表达体为LncRNAANRIL；所述确定LncRNA ANRIL在ALL细胞系中的表达模式的方法包括：进行RNA提取及qRT‑PCR；进行细胞培养；进行RNAi实验；进行细胞增殖及凋亡测定；进行统计学分析。本发明采用qPCR分析ANRIL在儿童ALL中的表达模式及其在该病的临床诊断、分型、治疗等方面潜在的应用价值，并进行体外实验验证其异常表达对白血病细胞增殖及凋亡的影响，验证其重要的调控功能和生物学机制，为阐明ANRIL的调控机制及临床转化和应用提供指导，并进一步进行体外实验为ANRIL的临床转化和应用提供指导。

技术领域

本发明属于基因技术领域，尤其涉及一种LncRNA ANRIL在儿童急性淋巴细胞白血病中的临床应用。

背景技术

目前，急性淋巴细胞白血病(Acute lymphoblastic leukemia，ALL)是14岁以下儿童最常见的血液肿瘤。尽管随着诊断和分型水平的提高以及治疗方案的改进，5年生存率达到85％，但是难治和复发的ALL依然是儿童肿瘤死亡的首要因素。儿童ALL是一种包括多种亚型的复杂疾病，其发病机制涉及多种不同的遗传变异，如：染色体数目异常、重排以及点突变等。不同的变异通过影响细胞正常增殖、分化以及凋亡等多种关键的调控过程导致白血病的发生。因此，进一步探究儿童ALL发生发展过程的分子机制、寻找新的诊断及预后标志物是非常有必要的，具有重要的临床意义。

有研究发现一些基因的表达可以有效区分儿童ALL的亚型，从而调整治疗方案提高疗效。但是以上研究主要集中在蛋白基因，特别是一些疾病相关的代谢及信号转导通路相关基因。长链非编码RNA(LncRNA)是一类长度超过200nt且无蛋白编码能力的功能性RNA分子，近年来受到很多学者的关注，是RNA研究领域的热点。LncRNA能与多种生物分子结合，可调控染色质修饰、DNA甲基化、组蛋白修饰、转录激活或抑制等生物学过程，在表观、转录以及转录后等不同水平影响、调控基因表达。LncRNA不仅与蛋白基因相互作用，也与miRNA存在相互作用，形成复杂的调控网络，发挥复杂的调控功能。

LncRNA不仅与细胞生长、发育、代谢及凋亡等正常生理过程相关，而且在肿瘤发生、发展、侵袭及转移过程中起重要调控作用。目前已经发现大量肿瘤相关的lncRNA，其中一部分lncRNA可作为肿瘤诊断、分型、预后的标志物以及治疗靶标，有着重要的临床价值。如HOTAIR可与PRC复合体结合调控基因表达，在多种肿瘤中异常表达，其高表达与白血病、乳腺癌、肝癌、结直肠癌、胃癌等多种癌症的侵袭、转移及不良预后相关。最近基于pre-BcALL样本的研究，发现部分lncRNA表达可以准确分类疾病亚型，并且和预后相关。Dimitrios Papaioannou等人研究发现24个lncRNA可以作为AML的预后标志物，其表达模式与患者无事件生存率以及无病生存率显著相关，具有重要的临床价值，并且关联分析结果显示，lncRNA参与调控肿瘤相关的信号转导通路。Manon Ouimet等人在preB-cALL病例中发现5个显著上调的lncRNA，并且发现RP11-137H2.4与泼尼松龙耐药性相关。以上研究表明lncRNA不仅与白血病发病相关，还有可能作为白血病潜在的诊断及预后的标志物，但是其调控机制尚需要进一步深入研究。因此，筛选儿童ALL特异的lncRNA不仅有利于阐明其相关的调控机制，更有利于发现特异性高的诊断和治疗的分子标记物，对儿童ALL的早期诊断、指导治疗有重要的临床意义。