[发明专利]一种呼吸道病原体检测用组合物、试剂盒及其应用在审
申请号: | 202110643900.8 | 申请日: | 2021-06-09 |
公开(公告)号: | CN113430301A | 公开(公告)日: | 2021-09-24 |
发明(设计)人: | 宋元林;郭玮;杨孙孝;钟涛;顾东东;周建;王蓓丽;杨轶慧;陈翠翠;陈小燕;王璐;张翠平;宋娟 | 申请(专利权)人: | 上海伯杰医疗科技有限公司 |
主分类号: | C12Q1/70 | 分类号: | C12Q1/70;C12Q1/686;C12Q1/689;C12Q1/04;C12N15/11 |
代理公司: | 上海申汇专利代理有限公司 31001 | 代理人: | 翁若莹 |
地址: | 201415 上海市奉贤区沪杭公路1588号3号楼13*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | |||
搜索关键词: | 一种 呼吸道 病原体 检测 组合 试剂盒 及其 应用 | ||
1.一种呼吸道病原体检测用组合物,其特征在于,该组合物包括:
用于三通道荧光PCR检测的引物对组合物,该组成引物对组合物的序列为SEQ ID No.1~SEQ ID No.24和SEQ ID No.116~SEQ ID No.139;
用于三通道荧光PCR检测的探针组合物,该组成探针组合物序列为SEQ ID No.39~SEQID No.62;
用于双通道荧光PCR检测的引物对组合物,该组成引物对组合物的序列为SEQ IDNo.25~SEQ ID No.38和SEQ ID No.140~SEQ ID No.153;
用于双通道荧光PCR检测的探针对组合物,该组成探针组合物的序列为SEQ ID No.63~SEQ ID No.76。
2.根据权利要求1所述的一种呼吸道病原体检测用组合物,其特征在于,所述的呼吸道病原体的检测靶序列为SEQ ID No.77~SEQ ID No.114。
3.根据权利要求2所述的一种呼吸道病原体检测用组合物,其特征在于,针对呼吸道病原体的检测靶序列设计的内参引物和探针为:
上游引物:CTTCAGCATGGCGGTGTTT;
下游引物:CCGCGCAGAGCCTTCA;
探针:CAGATTTGGACCTGCGAGCGGG。
4.根据权利要求1-3任一项所述的一种呼吸道病原体检测用组合物,其特征在于,
SEQ ID No.39~SEQ ID No.46的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括FAM荧光基团;
SEQ ID No.47~SEQ ID No.54的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括VIC荧光基团;
SEQ ID No.55~SEQ ID No.62的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括CY5荧光基团;
SEQ ID No.63~SEQ ID No.70的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括FAM荧光基团;
SEQ ID No.71~SEQ ID No.76的探针序列的5’端修饰的荧光基团包括VIC荧光基团。
5.根据权利要求4所述的一种呼吸道病原体检测用组合物,其特征在于,
针对SEQ ID No.1~SEQ ID No.24和SEQ ID No.116~SEQ ID No.139所示的序列以及SEQ ID No.39~SEQ ID No.62探针组合物设计的内参探针序列上修饰的荧光基团为ROX;
针对SEQ ID No.25~SEQ ID No.38和SEQ ID No.140~SEQ ID No.153所示的序列以及SEQ ID No.63~SEQ ID No.76探针组合物设计的内参探针序列上修饰的荧光基团为VIC。
6.一种呼吸道病原体检测用试剂盒,其特征在于,该试剂盒包括如权利要求1-5任一项所述的呼吸道病原体检测用组合物。
7.根据权利要求6所述的一种呼吸道病原体检测用试剂盒,其特征在于,该试剂盒具体包括用于检测RNA病原体的Panel A和用于检测DNA病原体Panel B;
所述Panel A包括SEQ ID No.1~SEQ ID No.24和SEQ ID No.116~SEQ ID No.139所示的序列引物对、SEQ ID No.39~SEQ ID No.62所示的探针及内参引物探针、第一核酸扩增反应液及酶混合液;
所述Panel B包括SEQ ID No.25~SEQ ID No.38和SEQ ID No.140~SEQ ID No.153所示的序列引物、SEQ ID No.63~SEQ ID No.76所示的探针及内参引物探针、第二核酸扩增反应液。
8.根据权利要求7所述的一种呼吸道病原体检测用试剂盒,其特征在于,所述的酶混合液包括逆转录酶、RNA酶抑制剂以及Taq酶。
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