[发明专利]一种人乳头瘤病毒分型定量检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明公开了一种本发明属于核酸检测技术领域，具体涉及一种人乳头瘤病毒分型定量检测试剂盒的制备及应用，可以应用于宫颈癌筛查流程的风险分层，试剂盒检测包含与宫颈癌发生发展相关的18种高、中危型别，其中根据不同型别的风险等级可以对HPV16、18、31、33、52、58进行分型和定量分析，对除了以上6种型别以外的其它型别进行定量分析，最终通过配套分析软件对检测结果进行综合风险评分，用于风险分层。

技术领域：

本发明属于核酸检测技术领域，特别涉及一种人乳头瘤病毒分型定量检测试剂盒，及其检测方法。

背景技术：

子宫颈癌是最常见的妇科恶性肿瘤之一，也是目前唯一一个病因明确的恶性肿瘤。根据世界卫生组织统计，在全球范围内，2018年估计有57万例新病例，占所有女性癌症死亡人数的7.5％。在每年估计超过31.1万例死于宫颈癌的死亡中，其中超过85％发生在欠发达地区。在发达国家，已经实施了一些方案，女性可以接受针对人乳头瘤病毒的疫苗接种，并可以对妇女进行定期筛查。筛查可以在易于治疗的阶段识别出癌前病变。在这些国家，早期治疗可预防多达80 ％的宫颈癌。

人乳头瘤病毒(HPV)是一种主要存在于人皮肤、黏膜及女性宫颈上皮细胞异形区的微小共价双链环状DNA病毒，至今发现的HPV约有200多种，为一组形态和基因结构相似，但致瘤表现不同的病毒，可引起人类上皮的良性和恶性肿瘤。1995年国际癌症研究机构(IARC)正式宣布HPV某些型别持续性感染是导致宫颈癌的最主要因素。WHO把与宫颈癌发生有关的HPV型别称为高危型，与肿瘤不相关的称为低危型，最常见的低危型为HPV 6,11和81。依据IARC及其它研究成果，包括国家食品药品监督管理局HPV相关指导原则建议与宫颈癌相关的型别中HPV 16，18，31，33，35，39，45，51，52，56，58，59，68列为高危型别，HPV26，53，66，73，82列为中等风险型别。

研究提示在宫颈癌的发生中16、18、31、33等高危型的致癌性远远高于其他型别。70％以上的宫颈癌患者体内均发现感染HPV16或18型，不同型别的致癌性有所差异，如：HPV16见于50％的宫颈癌(多为鳞癌)；HPV18见于15％的宫颈癌(多为腺癌和神经内分泌癌)。美国阴道镜和宫颈病理学会将16和18型阳性列为病理学检测指症。HPV病毒载量，作为与感染细胞数和病毒数两者相关的参数，主要受两大因素的影响：HPV在宫颈表面感染程度和感染区域病毒量水平。病毒载量被认为是中度宫颈上皮内瘤变(CINⅡ)或更高级别的宫颈上皮内瘤变的潜在生物指征。尤其是病毒载量的持续监测而非单次测量是宫颈癌的发生发展的有效标志之一。

HPV感染是宫颈癌的直接病因。就大多数患者而言，从感染到最终宫颈癌的发生存在一个缓慢的潜伏期。为此，及时定期检测宫颈脱落细胞中HPV的有无及载量的变化在宫颈癌的早期筛查、辅助诊断和愈后评估等环节中显得尤为重要。

鉴于此，本发明提出了一种基于荧光定量PCR法的快速分型定量检测18种高、中危型别的试剂盒，能够实现双管内同时检测18种HPV型别，并能够满足较高的灵敏度，对其中风险级别高的型别进行分型和定量分析，在通过配套软件对检测结果进行综合风险评分，具有明确的临床意义及潜在的应用价值。

公开于该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不应当被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

发明内容：

本发明的目的在于提供一种人乳头瘤病毒分型定量检测试剂盒，可以应用于宫颈癌筛查流程的风险分层，试剂盒检测包含与宫颈癌发生发展相关的18种高、中危型别，其中根据不同型别的风险等级可以对HPV6、18、31、33、52、 58进行分型和定量分析，对除了以上6种型别以外的其它型别进行定量分析，最终通过配套分析软件对检测结果进行综合风险评分，用于风险分层。