[发明专利]一种鉴别中华鹅膏菌的核酸分子引物、方法及试剂盒在审
| 申请号： | 202110381995.0 | 申请日： | 2021-04-09 |
| 公开（公告）号： | CN113502343A | 公开（公告）日： | 2021-10-15 |
| 发明（设计）人： | 陈佳佳;宋杰;刘国华;于健;刘玉华;崔文博;宋微 | 申请（专利权）人： | 江苏农林职业技术学院;中国林业科学研究院热带林业研究所 |
| 主分类号： | C12Q1/6895 | 分类号： | C12Q1/6895;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/645 |
| 代理公司： | 广州骏思知识产权代理有限公司 44425 | 代理人： | 李国钊 |
| 地址： | 212400 江*** | 国省代码： | 江苏;32 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 鉴别 中华 鹅膏菌 核酸 分子 引物 方法 试剂盒 | ||
1.一种鉴别中华鹅膏菌的核酸分子引物LG02.173 F和LG02.173 R，其特征在于，其DNA序列为：
LG02.173 F：5’-CGATGACGATGACGACTC-3’
LG02.173 R：5’-ATTGGTGAGAGGCTTGGA-3’。
2.一种鉴别中华鹅膏菌的方法，其特征在于，采用如权利要求1所述的核酸分子引物，包括以下步骤：
S1：提取中华鹅膏菌待测样品DNA；
S2：以样品DNA为PCR扩增的模板，用核酸分子引物作为扩增引物进行PCR扩增，所述核酸分子引物为：
LG02.173 F：5’-CGATGACGATGACGACTC-3’
LG02.173 R：5’-ATTGGTGAGAGGCTTGGA-3’；
S3：对步骤S2的PCR扩增产物进行琼脂糖凝胶电泳检测。
3.根据权利要求2所述的鉴别中华鹅膏菌的方法，其特征在于，步骤S2中的PCR扩增反应体系包括以下体积百分比的组分：
4.根据权利要求3所述的鉴别中华鹅膏菌的方法，其特征在于，步骤S2中的PCR扩增反应体系的总体积为50μL。
5.根据权利要求2所述的鉴别中华鹅膏菌的方法，其特征在于，步骤S2中的PCR扩增条件为：94℃预变性4min；94℃变性30s，50℃退火30s，72℃延伸60s，35个循环；最后72℃延伸10min，产物保存4℃保存备用。
6.根据权利要求2所述的鉴别中华鹅膏菌的方法，其特征在于，步骤S3中，若样品的电泳结果中出现604bp片段，则鉴定样品为中华鹅膏菌。
7.一种鉴别中华鹅膏菌的PCR检测试剂盒，其特征在于，包括如权利要求1所述的核酸分子引物。
8.根据权利要求7所述的PCR检测试剂盒，其特征在于，PCR扩增反应体系包括以下体积百分比的组分：
9.根据权利要求8所述的PCR检测试剂盒，其特征在于，PCR扩增反应体系的总体积为50μL。
10.如权利要求7-9任一项所述的PCR检测试剂盒在鉴定中华鹅膏菌的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于江苏农林职业技术学院;中国林业科学研究院热带林业研究所，未经江苏农林职业技术学院;中国林业科学研究院热带林业研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/202110381995.0/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
