[发明专利]一种核桃仁多肽及其制备方法

说明书

本发明属于多肽制备技术领域，具体公开了一种核桃仁多肽及其制备方法。本发明通过超声波辅助复合酶提取核桃仁多肽的方法，有效地提高核桃仁多肽的提取率，同时通过核桃仁多肽与壳聚糖溶液、离子型交联剂间的反应，将核桃仁多肽制备成微粒，能够有效地掩盖核桃仁多肽酶解过程中存在的苦味，抑制微生物的生长，并且能够提高对核桃仁多肽的载量，进一步增强核桃仁多肽的作用效果，拓宽其应用范围。

技术领域

本发明属于多肽制备技术领域，涉及一种核桃仁多肽及其制备方法。

背景技术

我国核桃资源非常丰富，产量居世界之首，核桃食用价值很高，保健功能非常突出。核桃仁的蛋白质含量为14％～17％，其中含人体所需的8种必需氨基酸接近联合国粮农组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)规定的标准，是一种很好的植物蛋白。核桃所含的核桃蛋白是一种极优质的植物蛋白，除用于初级食品的制作外，还可作为食品基料或食品添加剂使用，应用前景广阔。目前，具有高附加值的核桃多肽已成为核桃蛋白的主要加工方向之一。生物活性肽是现今研究的热点活性物质之一，具有多种生理活性，而且与其它蛋白质类药物相比，它被机体吸收的效率更高，因此受到越来越多的关注。

目前核桃多肽生产主要以脱油核桃粕为原料，利用化学法或酶法降解而成。酶法与传统酸法、碱法加工相比，具有不可比拟优点，如不会有任何有害残留物质，具有高度专一性和高效性，酶制剂用量小，反应条件温和，营养成分损失少，易操作，能耗低等，但酶法提取时间长，易生微生物，且酶解之后会产生苦味，所以亟需开发出一种能够有效地提取保存核桃多肽的方法。

专利文献CN103468773A公开了一种核桃仁多肽的提取方法，包括以下步骤：(1)球磨粉碎：取脱油核桃粉，加入水，并加木瓜蛋白酶，采用球磨机对脱油核桃粉进行湿法粉碎得到超细粉体悬浊液；(2)酶水解：将悬浊液与球罐分离，向溶液中补充水，调整pH至6.0-7.0，继续加入木瓜蛋白酶，在55-65℃条件下，超声波处理20-30min，之后60℃条件下搅拌酶水解10-30min后离心即得。该发明通过将球磨超微粉碎、超声提取、木瓜蛋白酶酶解三者联合，对脱油核桃粉进行超微粉碎，颗粒细化，细胞破碎，蛋白质等大分子物质暴露溶解释放，超声处理进一步促使核桃蛋白从破碎的细胞中释放溶解，使多肽转化率大幅度提高。

专利文献CN103652314A公开了一种微囊化核桃肽及其制备方法，该微囊化核桃肽以冷榨核桃粕为原料，经酶解后包埋而得，所述的包埋壁材是质量比为1：0.1-5的羧甲基纤维素钠和β-环糊精。本发明制备的微囊化核桃肽蛋白质含量≥85％、肽含量≥80％、黄曲霉素B1≤4.0ug/kg。并且，本发明的制备方法操作简单，所生产的核桃肽具有溶解性好，稳定性高的特点。

发明内容

本发明技术主要提供一种核桃仁多肽，通过超声波辅助复合酶提取核桃仁多肽的方法能够有效地提高核桃仁多肽的提取率，同时通过将核桃仁多肽与壳聚糖溶液、离子型交联剂进行反应，将核桃仁多肽制备成微粒，能够有效地掩盖核桃仁多肽存在的苦味，抑制微生物的生长，提高对核桃仁多肽的载量，进一步增强核桃仁多肽的作用效果，拓宽其应用范围。

本发明是通过以下技术方案以实现上述目的：一种核桃仁多肽的制备方法，包括以下步骤：

S1、核桃仁浸泡后，去皮、均浆10～30min，调节pH值为7～8，利用超声波辅助搅拌，浸泡过夜后离心，去油层和下层沉淀，调节pH值为4～5，搅拌静置后离心，取沉淀层水洗至中性，在真空干燥箱中冷冻干燥，制得核桃蛋白粉；

S2、将步骤S1制得的核桃蛋白粉在复合酶的作用下进行酶解，得到酶解产物；

S3、将步骤S2得到的酶解产物进行沸水浴灭酶5～15min，之后进行离心，得到酶解液，利用凝胶电泳法对核桃仁多肽进行分离纯化，即得核桃仁多肽初产物；

S4、称取配方量的壳聚糖溶于水中形成壳聚糖溶液，之后加入配方量步骤S3制备得到的核桃仁多肽初产物和离子型交联剂，在室温下进行搅拌，然后将得到的产物进行离心，冷冻干燥，最终得到核桃仁多肽。