[发明专利]一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法在审
| 申请号： | 202110302845.6 | 申请日： | 2021-03-22 |
| 公开（公告）号： | CN112795630A | 公开（公告）日： | 2021-05-14 |
| 发明（设计）人： | 梁重阳;徐抒平;孙非;关鑫;徐冰 | 申请（专利权）人： | 吉林大学 |
| 主分类号： | C12Q1/6844 | 分类号： | C12Q1/6844 |
| 代理公司： | 吉林省中玖专利代理有限公司 22219 | 代理人： | 姜姗姗 |
| 地址： | 130012 吉林省长春市*** | 国省代码： | 吉林;22 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 利用 探针 快速 检测 环介导 等温 扩增 核酸 产物 方法 | ||
1.一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法，其特征在于，包括如下步骤：
S1、设计待检测样本环介导等温扩增引物和制备与待检测样本特异性结合的磁珠探针；
S2、将所述的环介导等温扩增引物与缓冲液与DNA聚合酶预混，加入待检测样本，加温进行反应后得到环介导等温扩增产物；
S3、将所述的磁珠探针加入到所述的环介导等温扩增产物，孵育；
S4、等温扩增液洗涤磁珠，再加入双链DNA染料，孵育；
S5、观察如果有荧光，判断所述的待测样本是否含有目标核酸序列。病毒则结果判断为阳性，如果没有荧光，则结果判断为阴性。
2.如权利要求1所述的一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法，其特征在于：所述磁珠探针是将根据环介导等温扩增产物的单链环状结构设计互补的单链探针修饰于磁珠表面得到。
3.如权利要求1所述的一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法，其特征在于：所述单链探针是生物素链霉亲和素系统修饰于磁珠表面。
4.如权利要求1所述的一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法，其特征在于：所述磁珠探针中的磁珠为但不限于具有超顺磁性的磁珠。
5.如权利要求1所述的一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法，其特征在于：所述的待测样本为来自病原体的基因样本。
6.如权利要求5所述的一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法，其特征在于：所述的病原体的基因样本为病原体DNA样本或是来自于病原体的RNA逆转录样本。
7.如权利要求1所述的一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法，其特征在于：步骤S5中的所述的检测信号为紫外灯下得到的荧光信号。
8.如权利要求1所述的一种利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法，其特征在于：步骤5还包括设置阴性对照组，所述的阴性对照组为无目标核酸序列的待测样本，有荧光或较强，则结果判断为阳性，没有荧光，则结果判断为阴性。
9.权利要求1至9中的任意所述的利用磁珠探针快速检测环介导等温扩增核酸产物的方法在检测目标核酸序列中的应用。
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