[发明专利]一种层层自组装益生菌微胶囊及其制备方法

权利要求书

1.一种层层自组装益生菌微胶囊的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)向多孔淀粉中加入缓冲液，静置，加入聚乙烯亚胺，恒温振荡反应，洗涤，干燥，得多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体；

(2)将上述多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、固体油脂混合，加入乳化剂的溶液，40℃~50℃恒温乳化，冷却，得填充固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体；

(3)向上述填充固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体的溶液中，加入三乙胺、二甲亚砜，搅拌，加入乙酸酐，反应，然后透析，产物冷冻干燥，得乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体；

(4)向上述乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体中，加入乳化剂的溶液，40℃~50℃乳化，加入脂肪酶，40~50℃反应10~20min，离心，产物冷冻干燥，得去除固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体；

(5)将最外层带负电的多层益生菌湿胶囊置于上述去除固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体的溶液中，搅拌，干燥，得层层自组装益生菌微胶囊；

其中，所述最外层带负电的多层益生菌湿胶囊的制备方法包括：

将带正电的生物聚电解质溶液与菌悬液混合，搅拌，离心，洗涤，得一层生物聚电解质吸附的益生菌湿胶囊；然后，将一层生物聚电解质吸附的益生菌湿胶囊置于带负电的生物聚电解质溶液中，搅拌，离心，洗涤，得二层生物聚电解质吸附后的益生菌湿胶囊；

重复上述步骤，得最外层带负电的至少二层生物聚电解质吸附的益生菌湿胶囊。

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(1)中，所述淀粉包括玉米淀粉、木薯淀粉、大米淀粉、甘薯淀粉、马铃薯淀粉中至少一种；

步骤(1)中，多孔淀粉、聚乙烯亚胺的质量比为1~3：1；

步骤(1)中，恒温振荡为30~50℃震荡8~16h；

步骤(1)中，缓冲液为磷酸盐缓冲液。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(2)中，多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、固体油脂、乳化剂的质量比为1：1~4：0.32~0.6；

步骤(2)中，所述乳化剂包括聚乙烯醇、十二烷基三聚乙醇磺酸钠、十二烷基苯磺酸钠中至少一种。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(3)中，所述填充固体油脂的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、三乙胺、二甲亚砜、乙酸酐的比例0.2~1.5g：2~10ml：10~50ml：1~5ml；

步骤(3)中，反应的时间为20~26h；

步骤(3)中，反应的温度为20~35℃。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

步骤(4)中，乙酰化的多孔淀粉-聚乙烯亚胺载体、乳化剂、脂肪酶的质量比为1.0 g：0.32~0.6g：0.1~1mg。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

所述步骤(5)中，带正电的生物聚电解质包括壳聚糖；带负电的生物聚电解质包括果胶、海藻酸钠、羟甲基纤维素钠、植酸钠、硫酸葡聚糖中至少一种。

7.根据权利要求1或6所述的制备方法，其特征在于，

步骤(5)中，所述菌悬液为经MRS液体培养基培养的益生菌溶液；所述菌悬液的浓度为1.0×10⁹～1.0×10¹⁰ CFU/ml。

8.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，

还包括：步骤(6)，对步骤(5)所得益生菌微胶囊进行干燥，得干燥化的益生菌微胶囊。

9.权利要求1~8任一项所述的方法制备得到的层层自组装益生菌微胶囊。