[发明专利]分子标记及其应用和鉴定无患子与毛瓣无患子种质的方法

说明书

本发明公开一种分子标记及其应用和鉴定无患子与毛瓣无患子种质的方法，所述分子标记，包括引物Samuk10G0092500、Samuk04G0084900、Samuk07G0006800、Samuk12G0105900和或Samuk03G0235800：用于鉴定无患子与毛瓣无患子种质；提取待测无患子或毛瓣无患子幼嫩叶片样品的DNA；根据SSR分子标记进行PCR扩增；毛细管电泳上机检测；对样品的原始数据进行分析，构建系统发育树；检测种质扩增产物结果判定其为无患子或毛瓣无患子。本发明基于基因测序仪建立的荧光标记SSR毛细管电泳检测法是荧光测序技术与SSR分子标记技术的有效结合，实现了对SSR分子标记扩增产物长度的高效和准确获取，能够区分2bp之内的差异片段，准确获得扩增产物长度，检测结果更为稳定、准确和高效。

技术领域

本发明属于无患子种质鉴定领域，涉及用于鉴定无患子与毛瓣无患子种质的分子标记，以及该分子标记的应用，以及使用该分子标记鉴定无患子与毛瓣无患子种质的方法。

背景技术

无患子(Sapindus mukorossi Gaertn.)和毛瓣无患子(Sapindus rarak DC.)是无患子科(Sapindaceae)无患子属(Sapindus L.)乔木，在国外称肥皂果(Soapberry)，在国内也称洗手果、肥皂树、皮哨子等，毛瓣无患子仅在我国云南省分布，无患子在我国南方地区广泛分布。无患子与毛瓣无患子种仁含油率高达40％左右，油脂中油酸和亚油酸高达62.5％，C16～C20的脂肪酸占98.2％，符合现代生物质柴油各项标准，也可精炼为高档润滑油；果肉中含皂苷5～28％，是优良的天然洗涤化妆品原料，洗脱率超过90％；种壳可制作高级活性炭；国内外研究发现其种仁、果肉、根系中有极具开发潜力的抗癌、降脂、降压的功能性活性成分。因此，无患子与毛瓣无患子是我国集生物能源、生物化工和生物医药等于一体的多功能原料树种。

我国无患子与毛瓣无患子为无患子属近缘种，在我国云南省均有分布，种质资源丰富，但表型性状相似且易受发育阶段、栽培措施及环境条件影响，在云南省无患子与毛瓣无患子交错分布地区，很难从当代的表型区分无患子与毛瓣无患子，这给无患子与毛瓣无患子树种种质鉴定、杂交育种、新品种选育等带来了很大困难。因此本研究团队开展分子生物学SSR分子标记辅助鉴定无患子与毛瓣无患子种质资源，促进无患子与毛瓣无患子良种选育，加快种质资源的开发利用，保护无患子与毛瓣无患子种质资源多样性。

现有技术中还没有利用转录组测序的SSR分子标记鉴定无患子与毛瓣无患子种质相关的文献资料公开。

发明内容

鉴于此，本发明目的在于提供一种能够快速、准确地鉴定无患子与毛瓣无患子种质的分子标记。

本发明的另一目的是提供一种鉴定无患子与毛瓣无患子种质的分子标记的应用。

本发明的又一目的是提供一种鉴定无患子与毛瓣无患子种质的方法。

发明人通过长期的探索和尝试，以及多次的实验和努力，不断的改革创新，为解决以上技术问题，本发明提供的技术方案是，提供一种分子标记，用于鉴定无患子与毛瓣无患子种质，所述分子标记为下列引物中的一对或多对序列：

Samuk10G0092500：

上游引物：5'-TTCTTCCGATTGAGCGCCAT-3'；

下游引物：5'-CGAATCCAGTGGCAGTAGCA-3'；

Samuk04G0084900：

上游引物：5'-CTAGCTGTGGGGGCACATAC-3'；

下游引物：5'-GCATATTAGCACCGACCGGA-3'；

Samuk07G0006800：

上游引物：5'-GAAGCCGGATCTAATGGGCA-3'；