[发明专利]一种利用鲟鱼骨制备软骨修复注射剂的方法

说明书

本发明涉及一种利用鲟鱼骨制备软骨修复注射剂的方法，包括以下步骤：1）鲟鱼骨预处理；2）海参再生因子制备；3）注射剂制备。本发明采用鲟鱼软骨下脚料，通过水热处理、研磨耦合生物处理，提取鱼骨活性水溶成分，利用柱层析分离海参生长因子，再配以盐酸氨基葡萄糖、二乙醇胺、壳聚糖，获得软骨修复注射剂。本发明利用鱼骨中的胶原和软骨中生长因子、海参促生长细胞，再辅以氨糖和壳聚糖，各成分协同施效，赋予软骨组织再生的功效，且生物相容性好，无副作用。

技术领域

本发明属于药物制剂领域，具体涉及一种利用鲟鱼骨制备软骨修复注射剂的方法。

背景技术

动物软骨组织中含有大量硫酸软骨素，糖链中编码了大量的生物信息。硫酸软骨素能参与细胞分裂、分化、组织器官形成和中枢神经系统发育等生理过程。硫酸软骨素与钙结合对硫酸软骨素的生物功能有着重要作用，由于硫酸软骨素促进钙的吸收的性能显著，所以对骨组织的重新生成具有更优越的功效。

氨糖是来源于甲壳素的一种天然糖类，是软骨基质中的主要成份，对受损的软骨细胞具有润滑和保护作用。氨糖可控制软骨症状发展，有利于软骨的修复。实验证实服用氨糖4～6周后效果显著，长期服用后的副作用较小，也较温和。

目前，骨关节修复注射剂产品在长期测试中发现稳定性欠佳，长期保存有效成分会发生部分降解，极大影响药物的疗效，且会产生各种毒副作用，安全性难于保证。另外，现有注射液的制备通常经过高温灭菌，有效成分更易氧化、降解，安全性和有效性不能保证的同时过程繁琐、条件限制严格，不适合批量生产。因此，本领域亟需开发一种稳定性好、安全性和有效性高的软骨修复注射剂，以及稳定性和重现性好并适合批量生产的产品。

发明内容

为了克服现有技术中的不足，本发明的目的在于提供一种利用鲟鱼骨制备软骨修复注射剂的方法，本发明提供的软骨修复注射剂具有止痛效果好，抗感染，修复软骨组织作用快，且该注射剂具有稳定性、安全性和有效性，生产过程简洁，适合工业化大生产。

本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：一种利用鲟鱼骨制备软骨修复注射剂的方法，其特征在于，制备方法包括如下具体步骤：

1）鲟鱼骨预处理

a、取鲟鱼骨500-800g，用蒸馏水冲洗干净，放入杀菌锅中，在温度115-121℃、压力0.1-0.125MPa蒸15-20min，取出冷却，用粉碎机粉碎并匀浆处理，匀浆液固形物质量百分浓度调整为65-80%；

b、取步骤a所得的匀浆液，加入匀浆液重量3-5%胶原蛋白酶、2-6%乳酸杆菌、9-15%氢氧化钠，在温度35-55℃研磨90-150min，同时进行超声处理，研磨结束加入等质量的注射用水，滤除固形物，获得硫酸软骨素备用液；

2）海参再生因子制备

取海参，用剪刀从海参腹部剪破，收集海参体腔液，将体腔液上样至阳离子交换柱，用清洗液冲冼2~5个柱体积后，再用洗脱液洗脱，收集在275~288nm处有紫外吸收峰的成分，收集液冷冻干燥即得海参生长因子；

3）注射剂制备

c、取步骤1）b中制备的硫酸软骨素备用液，步骤2）的海参生长因子，添加盐酸氨基葡萄糖、二乙醇胺、壳聚糖，混合均匀，得混合物料；

d、将步骤c中混合物料用环氧乙烷杀菌，得软骨修复注射剂。

作为优选，其特征在于，所述步骤1）b中超声条件为：超声频率11-14KHz，超声功率0.6-1.5W/cm2。

作为优选，其特征在于，所述步骤3）c中混合物料质量百分组成为硫酸软骨素备用液15-20%、海参生长因子8-10%、盐酸氨基葡萄糖3-5%、二乙醇胺5-12%、壳聚糖2-4%，余量为注射用水。